瞬时转染和稳定转染对RNAi抑制乙型肝炎病毒S基因表达的影响
순시전염화은정전염대RNAi억제을형간염병독S기인표체적영향
Effect of transient and stable transfection on inhibition of hepatitis B virus S gene expression by RNA interference
  • 万方数据
    第四军医大学学报 제사군의대학학보
    JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
    2005年 11期 961-964 ,共4页

    刘家云%李庆霞%黄红艳%马龙洋%鲍炜%贾林涛%薛采芳%刘军%王成济%杨安钢

    류가운%리경하%황홍염%마룡양%포위%가림도%설채방%류군%왕성제%양안강

    乙型肝炎病毒%RNA干涉%转染 乙型肝炎病毒%RNA榦涉%轉染
    을형간염병독%RNA간섭%전염
    目的:构建针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因的siRNA表达载体Psuper-S1和Psuper-S2,观察瞬时转染及稳定转染对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.方法:设计并合成针对HBV S基因的siRNA寡核苷酸,经退火形成双链后克隆入Psuper载体,构建成功的siRNA表达载体分别瞬时转染和稳定转染表达HBV的2.2.15细胞,对所得细胞上清中的HBsAg和HBeAg进行定量检测,RT-PCR检测siRNA对靶基因Mrna的抑制效果,并比较两种转染方式对RNAi抑制HBV基因表达作用的影响.结果:在稳定转染并经潮霉素筛选所得的单克隆细胞株中,Psuper-S1和Psuper-S2均能明显抑制HBsAg及HBeAg的分泌(P<0.01),抑制率分别为83%和78%,RT-PCR结果证实HBV的Mrna明显降低,而瞬时转染细胞在蛋白质水平上及Mrna水平上的结果则比稳定转染的结果逊色.结论:针对HBV S基因的siRNA能稳定、高效、特异地抑制HBV基因的表达,转染效率对于靶基因的RNA干涉作用有明显的影响.
    목적:구건침대을형간염병독(HBV)S기인적siRNA표체재체Psuper-S1화Psuper-S2,관찰순시전염급은정전염대RNAi억제HBV기인표체작용적영향.방법:설계병합성침대HBV S기인적siRNA과핵감산,경퇴화형성쌍련후극륭입Psuper재체,구건성공적siRNA표체재체분별순시전염화은정전염표체HBV적2.2.15세포,대소득세포상청중적HBsAg화HBeAg진행정량검측,RT-PCR검측siRNA대파기인Mrna적억제효과,병비교량충전염방식대RNAi억제HBV기인표체작용적영향.결과:재은정전염병경조매소사선소득적단극륭세포주중,Psuper-S1화Psuper-S2균능명현억제HBsAg급HBeAg적분비(P<0.01),억제솔분별위83%화78%,RT-PCR결과증실HBV적Mrna명현강저,이순시전염세포재단백질수평상급Mrna수평상적결과칙비은정전염적결과손색.결론:침대HBV S기인적siRNA능은정、고효、특이지억제HBV기인적표체,전염효솔대우파기인적RNA간섭작용유명현적영향.
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