CAJ | 학술논문

目的:探讨培养的小鼠小肠和胃Cajal间质细胞(ICC)起搏电流的特性.方法:用二型胶原酶分离ICC并在含有干细胞因子的培养液中培养,72 h后通过免疫组织化学方法进行鉴定.利用传统全细胞模式膜片钳技术记录胃窦和小肠ICC的起搏电流.把电极内液的钙螯合剂EGTA浓度由0.1 mmol/L增加到10 mmol/L,使游离钙浓度降低,观察细胞内低钙对起搏电流的影响.结果:培养72 h后的ICC在光镜下表现出自胞体发出2-4条长突起,并与邻近ICC突起相互连接成网络状;激光共聚焦显微镜下观察到ICC表面酪氨酸激酶受体c-kit表达呈阳性;膜电位钳制在-60 mV的条件下,ICC上可以记录到自发而节律性内向电流,即起搏电流.在胃和小肠ICC之间以及单个ICC和ICC网络之间,电流幅度、频率有差异.在传统的全细胞膜片钳模式下,通过增加电极内液中EGTA浓度使细胞内游离钙降低时,可以激活ICC的内向电流;在细胞外给予钙调蛋白抑制剂W-7时,可以激活ICC内向电流的同时明显增加起搏电流的幅度.结论:小鼠胃和小肠ICC产生的起搏电流频率与小鼠胃和小肠自律运动的频率非常接近;网络ICC产生的起搏电流比单个ICC稳定、幅度高、频率快;ICC内游离钙浓度的降低是产生起搏电流的重要因素;钙调蛋白在ICC内参与起搏电流的抑制性调节.
목적:탐토배양적소서소장화위Cajal간질세포(ICC)기박전류적특성.방법:용이형효원매분리ICC병재함유간세포인자적배양액중배양,72 h후통과면역조직화학방법진행감정.이용전통전세포모식막편겸기술기록위두화소장ICC적기박전류.파전겁내액적개오합제EGTA농도유0.1 mmol/L증가도10 mmol/L,사유리개농도강저,관찰세포내저개대기박전류적영향.결과:배양72 h후적ICC재광경하표현출자포체발출2-4조장돌기,병여린근ICC돌기상호련접성망락상;격광공취초현미경하관찰도ICC표면락안산격매수체c-kit표체정양성;막전위겸제재-60 mV적조건하,ICC상가이기록도자발이절률성내향전류,즉기박전류.재위화소장ICC지간이급단개ICC화ICC망락지간,전류폭도、빈솔유차이.재전통적전세포막편겸모식하,통과증가전겁내액중EGTA농도사세포내유리개강저시,가이격활ICC적내향전류;재세포외급여개조단백억제제W-7시,가이격활ICC내향전류적동시명현증가기박전류적폭도.결론:소서위화소장ICC산생적기박전류빈솔여소서위화소장자률운동적빈솔비상접근;망락ICC산생적기박전류비단개ICC은정、폭도고、빈솔쾌;ICC내유리개농도적강저시산생기박전류적중요인소;개조단백재ICC내삼여기박전류적억제성조절.