湖南师范大学自然科学学报
湖南師範大學自然科學學報
호남사범대학자연과학학보
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NORMALIS HUNANENSIS
2008年
2期
105-109
,共5页
刘如石%任道龙%徐甜%韩梅%胡翔%肖鲜%张健
劉如石%任道龍%徐甜%韓梅%鬍翔%肖鮮%張健
류여석%임도룡%서첨%한매%호상%초선%장건
Shh%基因克隆%原核表达
Shh%基因剋隆%原覈錶達
Shh%기인극륭%원핵표체
从小鼠(C57BL/6)10.5d胚胎中提取总RNA经RT-PCR扩增出编码小鼠Shh基因N端cDNA序列,克隆到大肠杆菌表达载体pQEN3构建重组表达质粒pQEN3-Shh-N.重组质粒转化大肠杆菌BL21,经1.0mmol/L IPTG诱导,在SDS-PAGE上检测到20kDa目的蛋白带,与Shh N端蛋白预期大小一致,其蛋白表达量达到了全菌总蛋白的约30%.重组蛋白经Western blot鉴定结果显示,在20kDa处出现单一的显色条带,说明表达的重组蛋白为Shh N端蛋白,为研究Shh蛋白N端与毛发生长的功能奠定了基础.
從小鼠(C57BL/6)10.5d胚胎中提取總RNA經RT-PCR擴增齣編碼小鼠Shh基因N耑cDNA序列,剋隆到大腸桿菌錶達載體pQEN3構建重組錶達質粒pQEN3-Shh-N.重組質粒轉化大腸桿菌BL21,經1.0mmol/L IPTG誘導,在SDS-PAGE上檢測到20kDa目的蛋白帶,與Shh N耑蛋白預期大小一緻,其蛋白錶達量達到瞭全菌總蛋白的約30%.重組蛋白經Western blot鑒定結果顯示,在20kDa處齣現單一的顯色條帶,說明錶達的重組蛋白為Shh N耑蛋白,為研究Shh蛋白N耑與毛髮生長的功能奠定瞭基礎.
종소서(C57BL/6)10.5d배태중제취총RNA경RT-PCR확증출편마소서Shh기인N단cDNA서렬,극륭도대장간균표체재체pQEN3구건중조표체질립pQEN3-Shh-N.중조질립전화대장간균BL21,경1.0mmol/L IPTG유도,재SDS-PAGE상검측도20kDa목적단백대,여Shh N단단백예기대소일치,기단백표체량체도료전균총단백적약30%.중조단백경Western blot감정결과현시,재20kDa처출현단일적현색조대,설명표체적중조단백위Shh N단단백,위연구Shh단백N단여모발생장적공능전정료기출.
