生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2009年
1期
76-79
,共4页
杨细媚%文阳安%万祥辉%涂植光
楊細媚%文暘安%萬祥輝%塗植光
양세미%문양안%만상휘%도식광
抗菌肽%CA%重叠PCR%串连表达%序列分析
抗菌肽%CA%重疊PCR%串連錶達%序列分析
항균태%CA%중첩PCR%천련표체%서렬분석
天蚕素A(Cecropin A,CA)是来源于惜古比天蚕(Hyalophoracecropia)的含有37个氨基酸的抗菌肽,在非极性环境中形成α螺旋型结构,具有抗菌活性强、抗菌谱广等特点.为降低天蚕素A对宿主的毒性及提高其表达丰度和稳定性,在序列分析的基础上设计了3条天蚕素A氨基酸序列,分别为CA19、CA36和CA210.根据大肠杆菌密码子的偏爱性分别合成相应的3对寡核苷酸链,并通过重叠PCR方法合成成熟肽CA.将含有CAl9、CA36、CA210和CA1～5个拷贝基因的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和BLR(DE3)PlysS,成功构建了串连融合表达载体,为下一步的抗菌活性及免疫表位的分析打下基础.
天蠶素A(Cecropin A,CA)是來源于惜古比天蠶(Hyalophoracecropia)的含有37箇氨基痠的抗菌肽,在非極性環境中形成α螺鏇型結構,具有抗菌活性彊、抗菌譜廣等特點.為降低天蠶素A對宿主的毒性及提高其錶達豐度和穩定性,在序列分析的基礎上設計瞭3條天蠶素A氨基痠序列,分彆為CA19、CA36和CA210.根據大腸桿菌密碼子的偏愛性分彆閤成相應的3對寡覈苷痠鏈,併通過重疊PCR方法閤成成熟肽CA.將含有CAl9、CA36、CA210和CA1～5箇拷貝基因的質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)和BLR(DE3)PlysS,成功構建瞭串連融閤錶達載體,為下一步的抗菌活性及免疫錶位的分析打下基礎.
천잠소A(Cecropin A,CA)시래원우석고비천잠(Hyalophoracecropia)적함유37개안기산적항균태,재비겁성배경중형성α라선형결구,구유항균활성강、항균보엄등특점.위강저천잠소A대숙주적독성급제고기표체봉도화은정성,재서렬분석적기출상설계료3조천잠소A안기산서렬,분별위CA19、CA36화CA210.근거대장간균밀마자적편애성분별합성상응적3대과핵감산련,병통과중첩PCR방법합성성숙태CA.장함유CAl9、CA36、CA210화CA1～5개고패기인적질립전화대장간균BL21(DE3)화BLR(DE3)PlysS,성공구건료천련융합표체재체,위하일보적항균활성급면역표위적분석타하기출.
