中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
8期
670-672
,共3页
李能章%邱荣蓉%黄园媛%邹灵秀%彭远义
李能章%邱榮蓉%黃園媛%鄒靈秀%彭遠義
리능장%구영용%황완원%추령수%팽원의
猪繁殖与呼吸综合征病毒%GP5蛋白%酿酒酵母%膜定位
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%GP5蛋白%釀酒酵母%膜定位
저번식여호흡종합정병독%GP5단백%양주효모%막정위
为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)gp5基因在酿酒酵母中表达后蛋白的定位位置,以此揭示PRRSV在感染细胞中获取囊膜的位置信息,本研究首先将gp5基因克隆到酿酒酵母表达载体pUG35的gfp基因上游,构建重组质粒pUG-gpS-gfp,电击导入酿酒酵母CEN.PK2中,经尿嘧啶缺陷型营养筛选,获得重组酵母pUG-gp5-gfp/CEN.PK2,在甲硫氨酸营养缺陷培养基诱导表达后,荧光显微镜观察显示,gp5-gfp融合基因在酿酒酵母中获得表达,所表达的融合荧光蛋白主要聚积位置与内质网和质膜的定位模式一致,表明GP5蛋白信号肽在酵母中起到了导向作用,揭示了PRRSV在宿主细胞中获得囊膜的可能位置.该研究为其他病毒在宿主细胞中的组装位置研究提供新的思路.
為研究豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)gp5基因在釀酒酵母中錶達後蛋白的定位位置,以此揭示PRRSV在感染細胞中穫取囊膜的位置信息,本研究首先將gp5基因剋隆到釀酒酵母錶達載體pUG35的gfp基因上遊,構建重組質粒pUG-gpS-gfp,電擊導入釀酒酵母CEN.PK2中,經尿嘧啶缺陷型營養篩選,穫得重組酵母pUG-gp5-gfp/CEN.PK2,在甲硫氨痠營養缺陷培養基誘導錶達後,熒光顯微鏡觀察顯示,gp5-gfp融閤基因在釀酒酵母中穫得錶達,所錶達的融閤熒光蛋白主要聚積位置與內質網和質膜的定位模式一緻,錶明GP5蛋白信號肽在酵母中起到瞭導嚮作用,揭示瞭PRRSV在宿主細胞中穫得囊膜的可能位置.該研究為其他病毒在宿主細胞中的組裝位置研究提供新的思路.
위연구저번식여호흡종합정병독(PRRSV)gp5기인재양주효모중표체후단백적정위위치,이차게시PRRSV재감염세포중획취낭막적위치신식,본연구수선장gp5기인극륭도양주효모표체재체pUG35적gfp기인상유,구건중조질립pUG-gpS-gfp,전격도입양주효모CEN.PK2중,경뇨밀정결함형영양사선,획득중조효모pUG-gp5-gfp/CEN.PK2,재갑류안산영양결함배양기유도표체후,형광현미경관찰현시,gp5-gfp융합기인재양주효모중획득표체,소표체적융합형광단백주요취적위치여내질망화질막적정위모식일치,표명GP5단백신호태재효모중기도료도향작용,게시료PRRSV재숙주세포중획득낭막적가능위치.해연구위기타병독재숙주세포중적조장위치연구제공신적사로.
