CAJ | 학술논문

目的探讨以乳腺癌特异抗原BA46基因转导树突状细胞(DC)治疗乳腺癌的可行性. 方法取健康人外周血,采用密度梯度离心的方法分离外周血单个核细胞(DC前体细胞),以AIM-V培养基于6孔板培养,贴壁5 h,轻轻洗去悬浮细胞(T细胞,冻存备用),取贴壁细胞,将细胞分为基因转染组及对照组,基因转染组感染携带BA46基因的重组腺相关病毒rAAV/BA46/Neo,对照组以293细胞冻融液刺激,两组细胞均采用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导DC前体细胞成熟.第7天,收集悬浮细胞(DC),显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析DC的表面标志CD80、CD86、CD40的表达情况;另取该DC与T细胞按1∶20比例混合,含5%人血清蛋白的AIM-V为培养基,同时加入IL-2与GM-CSF,共育7 d,诱导获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL),取BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T为靶细胞,采用51Cr释放法测量杀伤效率,同时以流式细胞仪检测CTL群体中CD8/CD4和CD8/CD56的比值. 结果 BA46基因转导的DC表面标志CD80、CD86、CD40的表达均明显高于对照组DC,所激活的T细胞对BA46阳性的乳腺癌细胞株Hs578T有很好的杀伤效果,此杀伤具有抗原特异性和MHC限制性,且该T细胞中CD8/CD4和CD8/CD56的比值均明显高于对照组(细胞裂解物冲击DC所激活的T细胞). 结论 BA46基因转染成功制备DC,并诱导特异的CTL,为乳腺癌的DC基因转染疗法打下基础.
목적탐토이유선암특이항원BA46기인전도수돌상세포(DC)치료유선암적가행성. 방법취건강인외주혈,채용밀도제도리심적방법분리외주혈단개핵세포(DC전체세포),이AIM-V배양기우6공판배양,첩벽5 h,경경세거현부세포(T세포,동존비용),취첩벽세포,장세포분위기인전염조급대조조,기인전염조감염휴대BA46기인적중조선상관병독rAAV/BA46/Neo,대조조이293세포동융액자격,량조세포균채용중조인립세포거서세포집락자격인자(GM-CSF)、백세포개소4(IL-4)、종류배사인자-α(TNF-α)유도DC전체세포성숙.제7천,수집현부세포(DC),현미경관찰세포형태,류식세포의분석DC적표면표지CD80、CD86、CD40적표체정황;령취해DC여T세포안1∶20비례혼합,함5%인혈청단백적AIM-V위배양기,동시가입IL-2여GM-CSF,공육7 d,유도획득세포독성T림파세포(CTL),취BA46양성적유선암세포주Hs578T위파세포,채용51Cr석방법측량살상효솔,동시이류식세포의검측CTL군체중CD8/CD4화CD8/CD56적비치. 결과 BA46기인전도적DC표면표지CD80、CD86、CD40적표체균명현고우대조조DC,소격활적T세포대BA46양성적유선암세포주Hs578T유흔호적살상효과,차살상구유항원특이성화MHC한제성,차해T세포중CD8/CD4화CD8/CD56적비치균명현고우대조조(세포렬해물충격DC소격활적T세포). 결론 BA46기인전염성공제비DC,병유도특이적CTL,위유선암적DC기인전염요법타하기출.