首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2005年
1期
37
,共1页
张天蓝%黄健%许善锦%王夔
張天藍%黃健%許善錦%王夔
장천람%황건%허선금%왕기
为探讨淫羊藿黄酮苷及其代谢产物对骨形成和骨吸收的调控作用,利用酶水解法和酸水解法分别制备了淫羊藿黄酮苷的2种代谢产物.采用鼠颅盖骨机械法分离和体外培养获得成骨细胞, 采用新生兔长干骨机械分离法获得破骨细胞,采用VD3诱导鼠骨髓的造血干细胞分化成破骨样的多核巨细胞.实验组培养液为10%胎牛血清+α MEM培养液+不同浓度淫羊藿黄酮苷及代谢产物,对照组不加药.分别用四甲基偶氮唑盐和3H-TdR法检测成骨细胞的增生和碱性磷酸酶,用骨钙素衡量成骨细胞的分化状态,用Actin-ring 染色观察破骨细胞形态变化,用图像分析仪分析体外骨吸收陷窝面积,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察OCL的形成,用RT-PCR法检测和破骨样细胞形成有关的分子机制.发现:淫羊藿黄酮苷及其代谢产物对大鼠成骨细胞的增生有明显的刺激作用,并能够促进成骨细胞合成分泌碱性磷酸酶, 但对成骨细胞晚期分化指标骨钙素无显著作用.同时,使破骨细胞Actin-ring回缩,从而使骨吸收陷窝面积减少.此外,淫羊藿黄酮苷及其代谢产物通过影响成骨细胞中RANKL和OPG的表达而达到抑制破骨样细胞形成.以上结果说明,淫羊藿黄酮苷及其代谢产物一方面抑制破骨样细胞形成和成熟的破骨细胞对骨基质的吸收,另一方面还能够通过刺激骨形成来调控骨代谢,其中刺激骨形成的效果较强.由此推断淫羊藿黄酮苷可能是淫羊藿抗骨质疏松作用的主要有效成分.
為探討淫羊藿黃酮苷及其代謝產物對骨形成和骨吸收的調控作用,利用酶水解法和痠水解法分彆製備瞭淫羊藿黃酮苷的2種代謝產物.採用鼠顱蓋骨機械法分離和體外培養穫得成骨細胞, 採用新生兔長榦骨機械分離法穫得破骨細胞,採用VD3誘導鼠骨髓的造血榦細胞分化成破骨樣的多覈巨細胞.實驗組培養液為10%胎牛血清+α MEM培養液+不同濃度淫羊藿黃酮苷及代謝產物,對照組不加藥.分彆用四甲基偶氮唑鹽和3H-TdR法檢測成骨細胞的增生和堿性燐痠酶,用骨鈣素衡量成骨細胞的分化狀態,用Actin-ring 染色觀察破骨細胞形態變化,用圖像分析儀分析體外骨吸收陷窩麵積,用抗酒石痠痠性燐痠酶染色觀察OCL的形成,用RT-PCR法檢測和破骨樣細胞形成有關的分子機製.髮現:淫羊藿黃酮苷及其代謝產物對大鼠成骨細胞的增生有明顯的刺激作用,併能夠促進成骨細胞閤成分泌堿性燐痠酶, 但對成骨細胞晚期分化指標骨鈣素無顯著作用.同時,使破骨細胞Actin-ring迴縮,從而使骨吸收陷窩麵積減少.此外,淫羊藿黃酮苷及其代謝產物通過影響成骨細胞中RANKL和OPG的錶達而達到抑製破骨樣細胞形成.以上結果說明,淫羊藿黃酮苷及其代謝產物一方麵抑製破骨樣細胞形成和成熟的破骨細胞對骨基質的吸收,另一方麵還能夠通過刺激骨形成來調控骨代謝,其中刺激骨形成的效果較彊.由此推斷淫羊藿黃酮苷可能是淫羊藿抗骨質疏鬆作用的主要有效成分.
위탐토음양곽황동감급기대사산물대골형성화골흡수적조공작용,이용매수해법화산수해법분별제비료음양곽황동감적2충대사산물.채용서로개골궤계법분리화체외배양획득성골세포, 채용신생토장간골궤계분리법획득파골세포,채용VD3유도서골수적조혈간세포분화성파골양적다핵거세포.실험조배양액위10%태우혈청+α MEM배양액+불동농도음양곽황동감급대사산물,대조조불가약.분별용사갑기우담서염화3H-TdR법검측성골세포적증생화감성린산매,용골개소형량성골세포적분화상태,용Actin-ring 염색관찰파골세포형태변화,용도상분석의분석체외골흡수함와면적,용항주석산산성린산매염색관찰OCL적형성,용RT-PCR법검측화파골양세포형성유관적분자궤제.발현:음양곽황동감급기대사산물대대서성골세포적증생유명현적자격작용,병능구촉진성골세포합성분비감성린산매, 단대성골세포만기분화지표골개소무현저작용.동시,사파골세포Actin-ring회축,종이사골흡수함와면적감소.차외,음양곽황동감급기대사산물통과영향성골세포중RANKL화OPG적표체이체도억제파골양세포형성.이상결과설명,음양곽황동감급기대사산물일방면억제파골양세포형성화성숙적파골세포대골기질적흡수,령일방면환능구통과자격골형성래조공골대사,기중자격골형성적효과교강.유차추단음양곽황동감가능시음양곽항골질소송작용적주요유효성분.
