复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2008年
3期
448-452
,共5页
戴文达%方涛林%李熙雷%林红%董健%陈峥嵘
戴文達%方濤林%李熙雷%林紅%董健%陳崢嶸
대문체%방도림%리희뢰%림홍%동건%진쟁영
骨髓间充质干细胞%细胞培养%细胞分化%组织工程
骨髓間充質榦細胞%細胞培養%細胞分化%組織工程
골수간충질간세포%세포배양%세포분화%조직공정
目的 探索一个高效分离和扩增人骨髓问充质干细胞的方法,并通过形态学和多向分化能力进行鉴定.方法 抽取人胸椎骨髓标本,联合利用密度梯度离心和差异贴壁法分离MSCs,体外扩增后传代,相差显微镜形态学观察和流式细胞仪检测细胞表面标记CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR.在地塞米松、左旋Vit C、β磷酸甘油、FK506作用下向成骨细胞诱导分化;在TGF-beta 3、重组人胰岛素、丙酮酸钠、亚硒酸等作用下向软骨细胞诱导分化;在地塞米松、IBMX、吲哚美辛的作用下向脂肪细胞诱导分化;在VEGF、bFGF作用下向血管内皮细胞分化.结果 原代和传代细胞呈梭形外观,生长增殖能力良好.细胞表面标记物CD13、CD29,HLA-2阳性,CD34、CD45和HLA-DR阴性.经定向诱导分化后,细胞分别呈现成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞的表型特征.结论 该方法能从人骨髓中高效分离和扩增MSCs,能成功定向分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和血管内皮细胞.
目的 探索一箇高效分離和擴增人骨髓問充質榦細胞的方法,併通過形態學和多嚮分化能力進行鑒定.方法 抽取人胸椎骨髓標本,聯閤利用密度梯度離心和差異貼壁法分離MSCs,體外擴增後傳代,相差顯微鏡形態學觀察和流式細胞儀檢測細胞錶麵標記CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45和HLA-DR.在地塞米鬆、左鏇Vit C、β燐痠甘油、FK506作用下嚮成骨細胞誘導分化;在TGF-beta 3、重組人胰島素、丙酮痠鈉、亞硒痠等作用下嚮軟骨細胞誘導分化;在地塞米鬆、IBMX、吲哚美辛的作用下嚮脂肪細胞誘導分化;在VEGF、bFGF作用下嚮血管內皮細胞分化.結果 原代和傳代細胞呈梭形外觀,生長增殖能力良好.細胞錶麵標記物CD13、CD29,HLA-2暘性,CD34、CD45和HLA-DR陰性.經定嚮誘導分化後,細胞分彆呈現成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和血管內皮細胞的錶型特徵.結論 該方法能從人骨髓中高效分離和擴增MSCs,能成功定嚮分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和血管內皮細胞.
목적 탐색일개고효분리화확증인골수문충질간세포적방법,병통과형태학화다향분화능력진행감정.방법 추취인흉추골수표본,연합이용밀도제도리심화차이첩벽법분리MSCs,체외확증후전대,상차현미경형태학관찰화류식세포의검측세포표면표기CD13、CD29、HLA-2、CD34、CD45화HLA-DR.재지새미송、좌선Vit C、β린산감유、FK506작용하향성골세포유도분화;재TGF-beta 3、중조인이도소、병동산납、아서산등작용하향연골세포유도분화;재지새미송、IBMX、신타미신적작용하향지방세포유도분화;재VEGF、bFGF작용하향혈관내피세포분화.결과 원대화전대세포정사형외관,생장증식능력량호.세포표면표기물CD13、CD29,HLA-2양성,CD34、CD45화HLA-DR음성.경정향유도분화후,세포분별정현성골세포、연골세포、지방세포화혈관내피세포적표형특정.결론 해방법능종인골수중고효분리화확증MSCs,능성공정향분화위성골세포、연골세포、지방세포화혈관내피세포.
