中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2008年
9期
56-60
,共5页
张业尼%路福平%李玉%王建玲%李静文
張業尼%路福平%李玉%王建玲%李靜文
장업니%로복평%리옥%왕건령%리정문
磷脂酰丝氨酸合成酶%枯草芽孢杆菌%异源表达%酶联比色法
燐脂酰絲氨痠閤成酶%枯草芽孢桿菌%異源錶達%酶聯比色法
린지선사안산합성매%고초아포간균%이원표체%매련비색법
应用 PCR技术从 Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830) 中扩增到大小为 1350bp编码磷脂酰丝氨酸合成酶的 DNA片段,将其插入枯草芽孢杆菌诱导型表达载体 pBES,获得重组质粒 pBES-pss后转化Bacillus subtilis DB104.经蔗糖诱导后,该磷脂酰丝氨酸合成酶在Bacillus subtilis DB104 (pBES-pss)中获得胞外分泌表达,SDS-PAGE分析发现目的蛋白分子量约为 52kDa,酶联比色法检测酶活力为 1.50U/ml,提高了磷脂酰丝氨酸合成酶的表达产量,为工业化发酵生产磷脂酰丝氨酸合成酶奠定了良好的基础.
應用 PCR技術從 Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830) 中擴增到大小為 1350bp編碼燐脂酰絲氨痠閤成酶的 DNA片段,將其插入枯草芽孢桿菌誘導型錶達載體 pBES,穫得重組質粒 pBES-pss後轉化Bacillus subtilis DB104.經蔗糖誘導後,該燐脂酰絲氨痠閤成酶在Bacillus subtilis DB104 (pBES-pss)中穫得胞外分泌錶達,SDS-PAGE分析髮現目的蛋白分子量約為 52kDa,酶聯比色法檢測酶活力為 1.50U/ml,提高瞭燐脂酰絲氨痠閤成酶的錶達產量,為工業化髮酵生產燐脂酰絲氨痠閤成酶奠定瞭良好的基礎.
응용 PCR기술종 Escherichia coli K12 Sgal-(ExPASy P23830) 중확증도대소위 1350bp편마린지선사안산합성매적 DNA편단,장기삽입고초아포간균유도형표체재체 pBES,획득중조질립 pBES-pss후전화Bacillus subtilis DB104.경자당유도후,해린지선사안산합성매재Bacillus subtilis DB104 (pBES-pss)중획득포외분비표체,SDS-PAGE분석발현목적단백분자량약위 52kDa,매련비색법검측매활력위 1.50U/ml,제고료린지선사안산합성매적표체산량,위공업화발효생산린지선사안산합성매전정료량호적기출.
