同位素
同位素
동위소
ISOTOPES
2009年
4期
213-217
,共5页
氚示踪%线粒体融合素基因-2(Mfn2)%基因沉默%物质代谢
氚示蹤%線粒體融閤素基因-2(Mfn2)%基因沉默%物質代謝
천시종%선립체융합소기인-2(Mfn2)%기인침묵%물질대사
采用同位素示踪技术研究RNAi介导线粒体融合素基因-2(Mfn2)沉默小鼠体内物质代谢变化.构建了含Mfn2短发卡RNA(short hair RNA, shRNA)干扰质粒和阴性对照质粒.24只BALB/c小鼠分为转染组和阴性对照组,每组各12只,转染组经尾静脉注射Mfn2干扰质粒,对照组注入阴性对照质粒.质粒注入5 d后,将氚水(3H2O)或氚标记葡萄糖(3-3H-Glucose)经腹腔或尾静脉注射到小鼠体内,留取血标本和组织标本,用液体闪烁计数仪测定标本放射性浓度,计算小鼠组织脂肪酸合成率和肝脏葡萄糖生成率,两组间均数比较采用t检验.结果显示,Mfn2基因转染组小鼠肝脏葡萄糖生成率为49.43±16 31,明显高于阴性对照组的24.91±4.07(P<0.05),肝脏、肌肉、心脏、脂肪组织的脂肪酸合成率分别为0.10±0.00、9.12±1 90、1.18±0.28、11.11±1.31,显著低于阴性对照组0.79±0.07,70.52±13.95,53.88±9 90,45.43±5.91.以上结果表明,Mfn2基因在体内葡萄糖和脂肪酸代谢中起重要作用.
採用同位素示蹤技術研究RNAi介導線粒體融閤素基因-2(Mfn2)沉默小鼠體內物質代謝變化.構建瞭含Mfn2短髮卡RNA(short hair RNA, shRNA)榦擾質粒和陰性對照質粒.24隻BALB/c小鼠分為轉染組和陰性對照組,每組各12隻,轉染組經尾靜脈註射Mfn2榦擾質粒,對照組註入陰性對照質粒.質粒註入5 d後,將氚水(3H2O)或氚標記葡萄糖(3-3H-Glucose)經腹腔或尾靜脈註射到小鼠體內,留取血標本和組織標本,用液體閃爍計數儀測定標本放射性濃度,計算小鼠組織脂肪痠閤成率和肝髒葡萄糖生成率,兩組間均數比較採用t檢驗.結果顯示,Mfn2基因轉染組小鼠肝髒葡萄糖生成率為49.43±16 31,明顯高于陰性對照組的24.91±4.07(P<0.05),肝髒、肌肉、心髒、脂肪組織的脂肪痠閤成率分彆為0.10±0.00、9.12±1 90、1.18±0.28、11.11±1.31,顯著低于陰性對照組0.79±0.07,70.52±13.95,53.88±9 90,45.43±5.91.以上結果錶明,Mfn2基因在體內葡萄糖和脂肪痠代謝中起重要作用.
채용동위소시종기술연구RNAi개도선립체융합소기인-2(Mfn2)침묵소서체내물질대사변화.구건료함Mfn2단발잡RNA(short hair RNA, shRNA)간우질립화음성대조질립.24지BALB/c소서분위전염조화음성대조조,매조각12지,전염조경미정맥주사Mfn2간우질립,대조조주입음성대조질립.질립주입5 d후,장천수(3H2O)혹천표기포도당(3-3H-Glucose)경복강혹미정맥주사도소서체내,류취혈표본화조직표본,용액체섬삭계수의측정표본방사성농도,계산소서조직지방산합성솔화간장포도당생성솔,량조간균수비교채용t검험.결과현시,Mfn2기인전염조소서간장포도당생성솔위49.43±16 31,명현고우음성대조조적24.91±4.07(P<0.05),간장、기육、심장、지방조직적지방산합성솔분별위0.10±0.00、9.12±1 90、1.18±0.28、11.11±1.31,현저저우음성대조조0.79±0.07,70.52±13.95,53.88±9 90,45.43±5.91.이상결과표명,Mfn2기인재체내포도당화지방산대사중기중요작용.