吉林医学
吉林醫學
길림의학
JILIN MEDICAL JOURANL
2011年
22期
4517-4519
,共3页
刘炜炜%黄永业%宋立巍%韩冰
劉煒煒%黃永業%宋立巍%韓冰
류위위%황영업%송립외%한빙
Interleukin-18基因%PCR%真核表达载体构建
Interleukin-18基因%PCR%真覈錶達載體構建
Interleukin-18기인%PCR%진핵표체재체구건
目的:通过克隆人的Interleukin-18 基因,构建Interleukin-18 基因的哺乳动物细胞真核表达载体.方法:把人基因组DNA 通过PCR 获得Interleukin-18,克隆载体pMD18-T/Interleukin-18,并将其转化到大肠杆菌里,最后进行重组真核表达载体pCDNA3.1/Interleukin-18的构建和鉴定.结果:以人总DNA 为模板扩增出580 bp左右的特异性条带,测序结果与GeneBank测序结果相比,除两个碱基外,其余的完全一致,翻译成的氨基酸序列相同.对重组质粒pCDNA3.1/Interleukin-18进行双酶切鉴定并测序,结果也完全一致.结论:重组质粒pCDNA3.1/Interleukin-18由真核载体pCDNA3.1和Interleukin-18 片段组成.且插入的Interleukin-18 片段与已知序列完全相同.
目的:通過剋隆人的Interleukin-18 基因,構建Interleukin-18 基因的哺乳動物細胞真覈錶達載體.方法:把人基因組DNA 通過PCR 穫得Interleukin-18,剋隆載體pMD18-T/Interleukin-18,併將其轉化到大腸桿菌裏,最後進行重組真覈錶達載體pCDNA3.1/Interleukin-18的構建和鑒定.結果:以人總DNA 為模闆擴增齣580 bp左右的特異性條帶,測序結果與GeneBank測序結果相比,除兩箇堿基外,其餘的完全一緻,翻譯成的氨基痠序列相同.對重組質粒pCDNA3.1/Interleukin-18進行雙酶切鑒定併測序,結果也完全一緻.結論:重組質粒pCDNA3.1/Interleukin-18由真覈載體pCDNA3.1和Interleukin-18 片段組成.且插入的Interleukin-18 片段與已知序列完全相同.
목적:통과극륭인적Interleukin-18 기인,구건Interleukin-18 기인적포유동물세포진핵표체재체.방법:파인기인조DNA 통과PCR 획득Interleukin-18,극륭재체pMD18-T/Interleukin-18,병장기전화도대장간균리,최후진행중조진핵표체재체pCDNA3.1/Interleukin-18적구건화감정.결과:이인총DNA 위모판확증출580 bp좌우적특이성조대,측서결과여GeneBank측서결과상비,제량개감기외,기여적완전일치,번역성적안기산서렬상동.대중조질립pCDNA3.1/Interleukin-18진행쌍매절감정병측서,결과야완전일치.결론:중조질립pCDNA3.1/Interleukin-18유진핵재체pCDNA3.1화Interleukin-18 편단조성.차삽입적Interleukin-18 편단여이지서렬완전상동.
