CAJ | 학술논문

目的:研究鞘内注射代谢型谷氨酸5受体(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)反义寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)时大鼠吗啡耐受发生情况及其对脊髓内G蛋白各亚型表达的影响.方法:将48只雄性SD大鼠随机分为6组:对照组(S组,n=14),反义链组(ANT组,n =6),错义链组(MIS组,n=6),吗啡耐受组(M组,n=6),反义链吗啡合用组(AM组,n=8)和错义链吗啡合用组(MM组,n=8).采用鞘内给药方式注射寡聚核苷酸、吗啡和生理盐水.以5μl含30 nM的寡聚核苷酸(ANT组,MIS组,AM组和MM组)或0.9％生理盐水(S组和M组)每日给药2次,连续5天.于第6天取6只S组及ANT组和MIS组大鼠L4/5脊髓行real-time PCR,观察其mGluR5的mRNA表达.其余大鼠于第6天起连续3天每日给吗啡2次,每次15 μg,S组以5 μl 0.9％生理盐水代替.给药后以热板试验测定其热痛阈,以缩爪阈值作为机械痛阈指标,并计算最大效应分数(maximum percent effect,MPE)进行比较.采用免疫印迹(western blot)方法检测并比较各组L4/5脊髓中G蛋白各亚型(Gαi,Gαo,Gαq和Gβ)的表达.结果:ANT组中mGluR5含量比S 组下降48.2％ (P＜0.05),MIS组无此效果.M组和MM组大鼠MPE％在第8天与S组比较无统计学差异(P＞0.05),AM组大鼠MPE％在第8天仍高于S组,有统计学意义(P＜0.05).AM组大鼠MPE％在第7～8天即显著高于M组(P＜0.05).第9天M组和MM组大鼠Gαi,Gαo,Gαq和Gβ 的蛋白表达量显著高于S组(P＜0.05).而AM组大鼠G蛋白各亚型表达量均与S组无显著性差异(P＞0.05),与M组相比显著下调(P＜0.05).结论:大鼠吗啡耐受发生时,大鼠腰段脊髓G蛋白各亚型表达均明显升高.鞘内注射mGluR5反义寡聚脱氧核苷酸能显著抑制大鼠吗啡耐受的发生并抑制G蛋白各亚型的表达升高.
목적:연구초내주사대사형곡안산5수체(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR5)반의과취탈양핵감산(oligodeoxynucleotide,ODN)시대서마배내수발생정황급기대척수내G단백각아형표체적영향.방법:장48지웅성SD대서수궤분위6조:대조조(S조,n=14),반의련조(ANT조,n =6),착의련조(MIS조,n=6),마배내수조(M조,n=6),반의련마배합용조(AM조,n=8)화착의련마배합용조(MM조,n=8).채용초내급약방식주사과취핵감산、마배화생리염수.이5μl함30 nM적과취핵감산(ANT조,MIS조,AM조화MM조)혹0.9％생리염수(S조화M조)매일급약2차,련속5천.우제6천취6지S조급ANT조화MIS조대서L4/5척수행real-time PCR,관찰기mGluR5적mRNA표체.기여대서우제6천기련속3천매일급마배2차,매차15 μg,S조이5 μl 0.9％생리염수대체.급약후이열판시험측정기열통역,이축조역치작위궤계통역지표,병계산최대효응분수(maximum percent effect,MPE)진행비교.채용면역인적(western blot)방법검측병비교각조L4/5척수중G단백각아형(Gαi,Gαo,Gαq화Gβ)적표체.결과:ANT조중mGluR5함량비S 조하강48.2％ (P＜0.05),MIS조무차효과.M조화MM조대서MPE％재제8천여S조비교무통계학차이(P＞0.05),AM조대서MPE％재제8천잉고우S조,유통계학의의(P＜0.05).AM조대서MPE％재제7～8천즉현저고우M조(P＜0.05).제9천M조화MM조대서Gαi,Gαo,Gαq화Gβ 적단백표체량현저고우S조(P＜0.05).이AM조대서G단백각아형표체량균여S조무현저성차이(P＞0.05),여M조상비현저하조(P＜0.05).결론:대서마배내수발생시,대서요단척수G단백각아형표체균명현승고.초내주사mGluR5반의과취탈양핵감산능현저억제대서마배내수적발생병억제G단백각아형적표체승고.