黑龙江大学自然科学学报
黑龍江大學自然科學學報
흑룡강대학자연과학학보
JOURNAL OF NATURAL SCIENCE OF HEILONGJIANG UNIVERSITY
2005年
5期
692-696
,共5页
于寒颖%杨谦%周东坡%金红星
于寒穎%楊謙%週東坡%金紅星
우한영%양겸%주동파%금홍성
arom基因%基因克隆%核盘菌
arom基因%基因剋隆%覈盤菌
arom기인%기인극륭%핵반균
根据五功能AROM蛋白保守区域设计简并引物,从核盘菌基因组中获得了一段大小为1626bp的DNA片段.结合Southern杂交结果,用反向PCR克隆了arom基因3'-末端4104bp的序列.序列分析结果表明,该DNA片段推测的氨基酸序列与烟曲霉、粗糙脉孢霉、构巢曲霉和粟酒裂殖酵母等的AROM蛋白同源,包含了部分5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSP合成酶)结构域、莽草酸激酶结构域、脱氢奎尼酸脱水酶(脱氢奎尼酸酶)结构域和脱氢莽草酸脱氢酶结构域,其中含有EPSP合成酶模式2(255-273)、莽草酸激酶模式(426-453)和Ⅰ型脱氢奎尼酸酶活性位点模式(659-687).
根據五功能AROM蛋白保守區域設計簡併引物,從覈盤菌基因組中穫得瞭一段大小為1626bp的DNA片段.結閤Southern雜交結果,用反嚮PCR剋隆瞭arom基因3'-末耑4104bp的序列.序列分析結果錶明,該DNA片段推測的氨基痠序列與煙麯黴、粗糙脈孢黴、構巢麯黴和粟酒裂殖酵母等的AROM蛋白同源,包含瞭部分5-烯醇丙酮酰莽草痠-3-燐痠閤成酶(EPSP閤成酶)結構域、莽草痠激酶結構域、脫氫奎尼痠脫水酶(脫氫奎尼痠酶)結構域和脫氫莽草痠脫氫酶結構域,其中含有EPSP閤成酶模式2(255-273)、莽草痠激酶模式(426-453)和Ⅰ型脫氫奎尼痠酶活性位點模式(659-687).
근거오공능AROM단백보수구역설계간병인물,종핵반균기인조중획득료일단대소위1626bp적DNA편단.결합Southern잡교결과,용반향PCR극륭료arom기인3'-말단4104bp적서렬.서렬분석결과표명,해DNA편단추측적안기산서렬여연곡매、조조맥포매、구소곡매화속주렬식효모등적AROM단백동원,포함료부분5-희순병동선망초산-3-린산합성매(EPSP합성매)결구역、망초산격매결구역、탈경규니산탈수매(탈경규니산매)결구역화탈경망초산탈경매결구역,기중함유EPSP합성매모식2(255-273)、망초산격매모식(426-453)화Ⅰ형탈경규니산매활성위점모식(659-687).
