安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
8期
3155-3156
,共2页
莫宁萍%岳昌武%刘坤祥%凌锌
莫寧萍%嶽昌武%劉坤祥%凌鋅
막저평%악창무%류곤상%릉자
重组效率%转化%分子克隆%体外连接
重組效率%轉化%分子剋隆%體外連接
중조효솔%전화%분자극륭%체외련접
[目的]为探索一种适于连接PCR产物和不同粘端的新方法.[方法]分别采用冻融法、割胶法、试剂盒法和牙签法连接PCR产物与质粒DNA以及酶切产物与质粒DNA,比较不同连接方法对重组效率的影响.[结果]采用冻融法和割胶法连接PCR产物与pMD18-T,其连接效率分别为94.00%和93.00%,略高于试剂盒法和牙签法.采用冻融法和割胶法连接酶切产物的重组效率分别为86.67%和88.00%,略高于试剂盒法和牙签法.牙签法简化了连接前DNA相关操作,具有较高的连接效率,完全能够满足普通连接反应,特别是粘端连接反应要求.[结论]割胶法具有很高的重组效率和转化效率,可以满足普通连接反应、文库构建对连接效率和转化效率的要求,具有一定的应用前景.
[目的]為探索一種適于連接PCR產物和不同粘耑的新方法.[方法]分彆採用凍融法、割膠法、試劑盒法和牙籤法連接PCR產物與質粒DNA以及酶切產物與質粒DNA,比較不同連接方法對重組效率的影響.[結果]採用凍融法和割膠法連接PCR產物與pMD18-T,其連接效率分彆為94.00%和93.00%,略高于試劑盒法和牙籤法.採用凍融法和割膠法連接酶切產物的重組效率分彆為86.67%和88.00%,略高于試劑盒法和牙籤法.牙籤法簡化瞭連接前DNA相關操作,具有較高的連接效率,完全能夠滿足普通連接反應,特彆是粘耑連接反應要求.[結論]割膠法具有很高的重組效率和轉化效率,可以滿足普通連接反應、文庫構建對連接效率和轉化效率的要求,具有一定的應用前景.
[목적]위탐색일충괄우련접PCR산물화불동점단적신방법.[방법]분별채용동융법、할효법、시제합법화아첨법련접PCR산물여질립DNA이급매절산물여질립DNA,비교불동련접방법대중조효솔적영향.[결과]채용동융법화할효법련접PCR산물여pMD18-T,기련접효솔분별위94.00%화93.00%,략고우시제합법화아첨법.채용동융법화할효법련접매절산물적중조효솔분별위86.67%화88.00%,략고우시제합법화아첨법.아첨법간화료련접전DNA상관조작,구유교고적련접효솔,완전능구만족보통련접반응,특별시점단련접반응요구.[결론]할효법구유흔고적중조효솔화전화효솔,가이만족보통련접반응、문고구건대련접효솔화전화효솔적요구,구유일정적응용전경.
