临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
臨床耳鼻嚥喉頭頸外科雜誌
림상이비인후두경외과잡지
JOURNAL OF CLINICAL OTORHINOLARYNGOLOGY HEAD AND NECK SURGERY
2008年
10期
462-465
,共4页
腺病毒%耳蜗%神经营养因子3
腺病毒%耳蝸%神經營養因子3
선병독%이와%신경영양인자3
目的:构建一个神经营养因子3(NT3)和绿色荧光蛋白(EGFP)基因共表达重组腺病毒载体,确定Ad/NT-3对离体耳蜗的转染效率和NT3对螺旋神经元存活的作用.方法:使用pAdeasy-1和pAdTrack CMV腺病毒载体系统,产生带绿色荧光标记的NT3重组腺病毒.转染培养新生的大鼠耳蜗基底膜,观察病毒的转染效率.对培养15 d的耳蜗进行神经丝蛋白200免疫荧光染色,计数螺旋神经元.观察NT3对神经存活的影响.结果:重组NT3病毒能够转染整个耳蜗组织中的各型细胞.以外沟细胞最高.约为49%,其次为齿间细胞,为27%.仅有少量的毛细胞和螺旋神经元被转染.Ad/NT-3重组腺病毒处理15 d的耳蜗螺旋神经元存活的数目多于Ad/EGFP腺病毒转染的耳蜗.结论:构建的Ad/NT-3重组腺病毒能够同时在耳蜗组织中表达EGFP和NT3蛋白,主要表达于外沟细胞和齿问细胞,这些细胞释放NT3能够维持耳蜗神经元存活.
目的:構建一箇神經營養因子3(NT3)和綠色熒光蛋白(EGFP)基因共錶達重組腺病毒載體,確定Ad/NT-3對離體耳蝸的轉染效率和NT3對螺鏇神經元存活的作用.方法:使用pAdeasy-1和pAdTrack CMV腺病毒載體繫統,產生帶綠色熒光標記的NT3重組腺病毒.轉染培養新生的大鼠耳蝸基底膜,觀察病毒的轉染效率.對培養15 d的耳蝸進行神經絲蛋白200免疫熒光染色,計數螺鏇神經元.觀察NT3對神經存活的影響.結果:重組NT3病毒能夠轉染整箇耳蝸組織中的各型細胞.以外溝細胞最高.約為49%,其次為齒間細胞,為27%.僅有少量的毛細胞和螺鏇神經元被轉染.Ad/NT-3重組腺病毒處理15 d的耳蝸螺鏇神經元存活的數目多于Ad/EGFP腺病毒轉染的耳蝸.結論:構建的Ad/NT-3重組腺病毒能夠同時在耳蝸組織中錶達EGFP和NT3蛋白,主要錶達于外溝細胞和齒問細胞,這些細胞釋放NT3能夠維持耳蝸神經元存活.
목적:구건일개신경영양인자3(NT3)화록색형광단백(EGFP)기인공표체중조선병독재체,학정Ad/NT-3대리체이와적전염효솔화NT3대라선신경원존활적작용.방법:사용pAdeasy-1화pAdTrack CMV선병독재체계통,산생대록색형광표기적NT3중조선병독.전염배양신생적대서이와기저막,관찰병독적전염효솔.대배양15 d적이와진행신경사단백200면역형광염색,계수라선신경원.관찰NT3대신경존활적영향.결과:중조NT3병독능구전염정개이와조직중적각형세포.이외구세포최고.약위49%,기차위치간세포,위27%.부유소량적모세포화라선신경원피전염.Ad/NT-3중조선병독처리15 d적이와라선신경원존활적수목다우Ad/EGFP선병독전염적이와.결론:구건적Ad/NT-3중조선병독능구동시재이와조직중표체EGFP화NT3단백,주요표체우외구세포화치문세포,저사세포석방NT3능구유지이와신경원존활.
