CAJ | 학술논문

目的:建立可稳定传代的肾透明细胞癌小鼠肺转移模型,并在此基础上初步筛选出肾透明细胞癌特异性鼠肺转移细胞亚株,为后续研究奠定基础.方法:选用本实验室前期建立的肾透明细胞癌细胞株RCC05-TXJ,体外扩增培养制成细胞悬液后注射于NOD-SCID小鼠颈背部皮下,成瘤后取出瘤组织接种于另外NOD-SCID小鼠的肾包膜下,待有肉眼可见瘤块后,处死小鼠并取出肿瘤组织接种于新NOD-SCID小鼠的肾包膜下,反复数轮,直至出现稳定的鼠肺转移模型.此时取模型鼠肺转移组织,一部分继续接种于新鼠肾包膜下,反复数轮,尝试以转移组织诱导肺转移;另一部分进行原代培养,细胞经体外扩增纯化后制成悬液接种于新鼠肾包膜,数轮循环至产生肺转移,筛选能产生稳定鼠肺转移的细胞亚株.整个筛选过程均观察记录原位成瘤、淋巴及肺转移形成情况,并对肿瘤组织进行病理组织学观察及CA9(肾癌标志)、CD133(干细胞标志)表达检测.结果:以RCC05-TXJ细胞株接种所致NOD-SCID小鼠颈背部皮下肿瘤组织作为移植瘤材接种鼠肾包膜在第2轮即出现鼠肺转移,此后3～6轮以鼠肺转移组织移植肾包膜下,均能成功诱导转移.以鼠肺转移组织原代培养RCC细胞均获成功,第6轮原代培养细胞扩增纯化后制成的细胞悬液(RCC05-TXJ-L)接种于鼠肾包膜下,出现特异性肺转移,重复2轮实验结果稳定.RCC05-TXJ-L细胞具有生长速度快(传代时间约为2 d)、原位成瘤时间短(1周左右)、接种后转移性较强、CA9及CD133表达升高等特点.结论:RCC05-TXJ在NOD-SCID小鼠体内多轮反复筛选可建立稳定的肾细胞癌鼠肺转移动物模型;在此基础上筛选出的肺转移性细胞亚株RCC05-TXJ-L可稳定诱导NOD-SCID鼠产生肺部转移.
목적:건립가은정전대적신투명세포암소서폐전이모형,병재차기출상초보사선출신투명세포암특이성서폐전이세포아주,위후속연구전정기출.방법:선용본실험실전기건립적신투명세포암세포주RCC05-TXJ,체외확증배양제성세포현액후주사우NOD-SCID소서경배부피하,성류후취출류조직접충우령외NOD-SCID소서적신포막하,대유육안가견류괴후,처사소서병취출종류조직접충우신NOD-SCID소서적신포막하,반복수륜,직지출현은정적서폐전이모형.차시취모형서폐전이조직,일부분계속접충우신서신포막하,반복수륜,상시이전이조직유도폐전이;령일부분진행원대배양,세포경체외확증순화후제성현액접충우신서신포막,수륜순배지산생폐전이,사선능산생은정서폐전이적세포아주.정개사선과정균관찰기록원위성류、림파급폐전이형성정황,병대종류조직진행병리조직학관찰급CA9(신암표지)、CD133(간세포표지)표체검측.결과:이RCC05-TXJ세포주접충소치NOD-SCID소서경배부피하종류조직작위이식류재접충서신포막재제2륜즉출현서폐전이,차후3～6륜이서폐전이조직이식신포막하,균능성공유도전이.이서폐전이조직원대배양RCC세포균획성공,제6륜원대배양세포확증순화후제성적세포현액(RCC05-TXJ-L)접충우서신포막하,출현특이성폐전이,중복2륜실험결과은정.RCC05-TXJ-L세포구유생장속도쾌(전대시간약위2 d)、원위성류시간단(1주좌우)、접충후전이성교강、CA9급CD133표체승고등특점.결론:RCC05-TXJ재NOD-SCID소서체내다륜반복사선가건립은정적신세포암서폐전이동물모형;재차기출상사선출적폐전이성세포아주RCC05-TXJ-L가은정유도NOD-SCID서산생폐부전이.