安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2011年
2期
128-131
,共4页
陈应炉%朱恒锐%杨军%耿慧武%刘君%刘晓颖%范礼斌
陳應爐%硃恆銳%楊軍%耿慧武%劉君%劉曉穎%範禮斌
진응로%주항예%양군%경혜무%류군%류효영%범례빈
基因表达%转染%蜕膜%孕酮%蛋白质类
基因錶達%轉染%蛻膜%孕酮%蛋白質類
기인표체%전염%세막%잉동%단백질류
目的 将孕酮诱导的蜕膜蛋白Depp基因构建到pCDGFP表达载体中,分析其在哺乳细胞株中的表达和定位情况.方法 用PCR方法扩增Depp全长序列,插入真核表达载体pCDGFP中,将构建好的质粒转染至COS7细胞,在荧光显微镜下观察其细胞定位;转染至HEK 293T细胞,提取总蛋白,利用GFP抗体进行Western blot检测.结果 荧光显微镜观察表明,Depp蛋白主要分布在COS7细胞的胞质内,在细胞核周呈斑块状分布,在细胞核未见到明显表达,在HEK293T细胞中能有效表达.结论 成功构建pCDGFP-Depp表达载体并确定Depp蛋白在哺乳细胞株中能有效表达.
目的 將孕酮誘導的蛻膜蛋白Depp基因構建到pCDGFP錶達載體中,分析其在哺乳細胞株中的錶達和定位情況.方法 用PCR方法擴增Depp全長序列,插入真覈錶達載體pCDGFP中,將構建好的質粒轉染至COS7細胞,在熒光顯微鏡下觀察其細胞定位;轉染至HEK 293T細胞,提取總蛋白,利用GFP抗體進行Western blot檢測.結果 熒光顯微鏡觀察錶明,Depp蛋白主要分佈在COS7細胞的胞質內,在細胞覈週呈斑塊狀分佈,在細胞覈未見到明顯錶達,在HEK293T細胞中能有效錶達.結論 成功構建pCDGFP-Depp錶達載體併確定Depp蛋白在哺乳細胞株中能有效錶達.
목적 장잉동유도적세막단백Depp기인구건도pCDGFP표체재체중,분석기재포유세포주중적표체화정위정황.방법 용PCR방법확증Depp전장서렬,삽입진핵표체재체pCDGFP중,장구건호적질립전염지COS7세포,재형광현미경하관찰기세포정위;전염지HEK 293T세포,제취총단백,이용GFP항체진행Western blot검측.결과 형광현미경관찰표명,Depp단백주요분포재COS7세포적포질내,재세포핵주정반괴상분포,재세포핵미견도명현표체,재HEK293T세포중능유효표체.결론 성공구건pCDGFP-Depp표체재체병학정Depp단백재포유세포주중능유효표체.
