CAJ | 학술논문

目的运用微管吸吮技术对海藻酸钠培养的兔膝关节软骨细胞力学特性进行定量分析,为软骨组织工程中相关力学因素的研究提供相应的技术参数并为最终利用组织工程治疗软骨损伤提供相关理论依据.方法 2月龄新西兰白兔6只,无菌条件下分离其双膝关节,以培养液配制的0.4%Protease酶、0.025%Ⅱ型胶原酶顺序消化兔软骨分离细胞,以4×106/ml浓度与海藻酸钠混合,通过硅胶盘模制成圆形柱状细胞盘(25μl/个),CaCl2溶液中凝胶化5min,DMEM/F12无血清培养基加20%FBS(fatalbloodsolution)于6孔培养板中培养.于1、2、4周取出细胞盘,采用微管吸吮技术结合半无限体模型分析软骨细胞的力学特性(瞬时模量E0、平衡模量E∞、表现黏性μ).利用流式细胞仪测定1、2、4周软骨细胞的凋亡.结果 1、2、4周软骨细胞两两相比软骨细胞的早期凋亡和活细胞比较均没有统计学意义(P>0.05).4周培养的软骨细胞黏弹性明显低于1周和2周(P<0.05),1周与2周之间比较不具有统计学意义(P>0.05);1、2、4周软骨细胞表现均为典型的黏弹性固体蠕变特征.结论通过微管吸吮力学测量海藻酸钠立体培养软骨细胞的力学特性相对较稳定,适合作为构建组织工程化软骨的种子细胞.
목적 운용미관흡전기술대해조산납배양적토슬관절연골세포역학특성진행정량분석,위연골조직공정중상관역학인소적연구제공상응적기술삼수병위최종이용조직공정치료연골손상제공상관이론의거.방법 2월령신서란백토6지,무균조건하분리기쌍슬관절,이배양액배제적0.4%Protease매、0.025%Ⅱ형효원매순서소화토연골분리세포,이4×106/ml농도여해조산납혼합,통과규효반모제성원형주상세포반(25μl/개),CaCl2용액중응효화5min,DMEM/F12무혈청배양기가20%FBS(fatalbloodsolution)우6공배양판중배양.우1、2、4주취출세포반,채용미관흡전기술결합반무한체모형분석연골세포적역학특성(순시모량E0、평형모량E∞、표현점성μ).이용류식세포의측정1、2、4주연골세포적조망.결과 1、2、4주연골세포량량상비연골세포적조기조망화활세포비교균몰유통계학의의(P>0.05).4주배양적연골세포점탄성명현저우1주화2주(P<0.05),1주여2주지간비교불구유통계학의의(P>0.05);1、2、4주연골세포표현균위전형적점탄성고체연변특정.결론 통과미관흡전역학측량해조산납입체배양연골세포적역학특성상대교은정,괄합작위구건조직공정화연골적충자세포.