生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2005年
1期
19-21
,共3页
林艳丽%彭清忠%汤国营%戴红梅%朱厚础
林豔麗%彭清忠%湯國營%戴紅梅%硃厚礎
림염려%팽청충%탕국영%대홍매%주후출
脑源性神经营养因子%可溶性表达%大肠杆菌
腦源性神經營養因子%可溶性錶達%大腸桿菌
뇌원성신경영양인자%가용성표체%대장간균
按照人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因成熟肽编码序列设计合成引物,从人基因组DNA中扩增出360 bp的片段,插入到改构载体pTIG-trx上,获得了pTIG-trx-BDNF原核表达重组质粒,限制性酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为hBDNF基因成熟肽编码序列.将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达,并对表达产物进行了分离纯化,得到纯度大于83%的样品,Western杂交证实该蛋白具有hBDNF抗原活性.
按照人腦源性神經營養因子(hBDNF)基因成熟肽編碼序列設計閤成引物,從人基因組DNA中擴增齣360 bp的片段,插入到改構載體pTIG-trx上,穫得瞭pTIG-trx-BDNF原覈錶達重組質粒,限製性酶切分析和DNA序列測定均證實該剋隆插入片段為hBDNF基因成熟肽編碼序列.將該重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導錶達,在大腸桿菌錶達繫統中穫得瞭高效可溶錶達,併對錶達產物進行瞭分離純化,得到純度大于83%的樣品,Western雜交證實該蛋白具有hBDNF抗原活性.
안조인뇌원성신경영양인자(hBDNF)기인성숙태편마서렬설계합성인물,종인기인조DNA중확증출360 bp적편단,삽입도개구재체pTIG-trx상,획득료pTIG-trx-BDNF원핵표체중조질립,한제성매절분석화DNA서렬측정균증실해극륭삽입편단위hBDNF기인성숙태편마서렬.장해중조질립전화대장간균BL21(DE3),경IPTG유도표체,재대장간균표체계통중획득료고효가용표체,병대표체산물진행료분리순화,득도순도대우83%적양품,Western잡교증실해단백구유hBDNF항원활성.
