军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2005年
1期
55-59
,共5页
重组人生长激素%周质%分泌型表达%表达量
重組人生長激素%週質%分泌型錶達%錶達量
중조인생장격소%주질%분비형표체%표체량
目的:构建分泌型重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)工程菌,优化工程菌表达条件.方法:应用T7启动子与ompA3引导序列构建分泌型表达rhGH工程菌,采用多因素正交优选法初步筛选培养基成分,进而考察葡萄糖对rhGH表达量的影响.在此培养基基础上优化诱导表达条件,分别考察了诱导起始菌密度、诱导温度、诱导剂浓度和诱导表达时间对rhGH表达量的影响.结果与结论:构建了高效分泌型表达rhGH工程菌,在优化培养基中摇瓶培养至D600值约为9.2,37℃进行诱导,IPTG浓度0.5 mmol/L,诱导后继续培养10～12 h,rhGH分泌表达量可达到 140～160 mg/L培养液,目的蛋白占周质总蛋白的30%～40%.
目的:構建分泌型重組人生長激素(recombinant human growth hormone,rhGH)工程菌,優化工程菌錶達條件.方法:應用T7啟動子與ompA3引導序列構建分泌型錶達rhGH工程菌,採用多因素正交優選法初步篩選培養基成分,進而攷察葡萄糖對rhGH錶達量的影響.在此培養基基礎上優化誘導錶達條件,分彆攷察瞭誘導起始菌密度、誘導溫度、誘導劑濃度和誘導錶達時間對rhGH錶達量的影響.結果與結論:構建瞭高效分泌型錶達rhGH工程菌,在優化培養基中搖瓶培養至D600值約為9.2,37℃進行誘導,IPTG濃度0.5 mmol/L,誘導後繼續培養10～12 h,rhGH分泌錶達量可達到 140～160 mg/L培養液,目的蛋白佔週質總蛋白的30%～40%.
목적:구건분비형중조인생장격소(recombinant human growth hormone,rhGH)공정균,우화공정균표체조건.방법:응용T7계동자여ompA3인도서렬구건분비형표체rhGH공정균,채용다인소정교우선법초보사선배양기성분,진이고찰포도당대rhGH표체량적영향.재차배양기기출상우화유도표체조건,분별고찰료유도기시균밀도、유도온도、유도제농도화유도표체시간대rhGH표체량적영향.결과여결론:구건료고효분비형표체rhGH공정균,재우화배양기중요병배양지D600치약위9.2,37℃진행유도,IPTG농도0.5 mmol/L,유도후계속배양10～12 h,rhGH분비표체량가체도 140～160 mg/L배양액,목적단백점주질총단백적30%～40%.
