中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
18期
3551-3554
,共4页
杨斌%丘日升%全大萍%岑静芸%官习鹏%洪清琦%董月桐
楊斌%丘日升%全大萍%岑靜蕓%官習鵬%洪清琦%董月桐
양빈%구일승%전대평%잠정예%관습붕%홍청기%동월동
角质细胞生长因子,脱细胞真皮%聚乳酸-羟基乙酸共聚物,纳米微囊,组织工程化皮肤
角質細胞生長因子,脫細胞真皮%聚乳痠-羥基乙痠共聚物,納米微囊,組織工程化皮膚
각질세포생장인자,탈세포진피%취유산-간기을산공취물,납미미낭,조직공정화피부
目的:构建一种荷载有角质细胞生长因子且能控制释放的新型组织工程化皮肤.方法:实验于2006-03/12于中山大学附属第二医院干细胞研究中心及中山大学高分子研究所进行.①材料:角质细胞生长因子(CytolLAB公司),牛血清白蛋白(Amresco公司),聚乳酸-羟基乙酸共聚物(由中山大学高分子化学研究所合成,聚乳酸与聚羟基乙酸摩尔比为75:25,相对分子质量为50 000),脱细胞真皮(北京桀亚莱福生物技术有限公司).②方法:采用超声乳化-溶剂挥发及低温干燥方法,将角质细胞生长因子以牛血清白蛋白作联接包裹在聚乳酸-羟基乙酸共聚物内制成纳米微囊,根据公式计算微囊成球率、载药量及包封率;将微囊溶解于二氯甲烷中,进行体外释放实验检测不同时间牛血清白蛋白吸光度,作出牛血清白蛋白释放曲线;将角质细胞生长因子纳米微囊交联于脱细胞真皮表面,制成荷载角质细胞生长因子纳米微囊脱细胞真皮(KGF-ADM),在扫描电镜下观察微囊形态、分布及其与脱细胞真皮连接情况;采用Ⅰ型胶原酶复合胰蛋白酶消化的方法,从门诊健康患者无菌手术切除的包皮组织中获取表皮细胞单细胞悬液,经免疫荧光检测,证实其中含表皮干细胞,将表皮干细胞群分别接种于KGF-ADM及聚乳酸-羟基乙酸共聚物上,于恒温箱中培养3 d后,在扫描电镜下观察细胞形态、生长情况及其与材料连接情况.结果:①纳米微囊成球率为85%,载药量为17.3%,包封率为73.5%.②纳米微囊中牛血清白蛋白可以控制缓慢释放,其释放曲线显示初期释放速度较快(前5 d累计释放约40%),后进入缓慢释放期(30 d累计释放约75%).③扫描电镜检测显示纳米微囊形态规则,在KGF-ADM表面分布均匀,与KGF-ADM联接良好,部分分布于KGF-ADM深面;表皮干细胞群在KGF-ADM上生长活跃,细胞形态良好,部分形成克隆.结论:采用该方法可成功构建荷载角质细胞生长因子纳米微囊的新型组织工程化皮肤.
目的:構建一種荷載有角質細胞生長因子且能控製釋放的新型組織工程化皮膚.方法:實驗于2006-03/12于中山大學附屬第二醫院榦細胞研究中心及中山大學高分子研究所進行.①材料:角質細胞生長因子(CytolLAB公司),牛血清白蛋白(Amresco公司),聚乳痠-羥基乙痠共聚物(由中山大學高分子化學研究所閤成,聚乳痠與聚羥基乙痠摩爾比為75:25,相對分子質量為50 000),脫細胞真皮(北京桀亞萊福生物技術有限公司).②方法:採用超聲乳化-溶劑揮髮及低溫榦燥方法,將角質細胞生長因子以牛血清白蛋白作聯接包裹在聚乳痠-羥基乙痠共聚物內製成納米微囊,根據公式計算微囊成毬率、載藥量及包封率;將微囊溶解于二氯甲烷中,進行體外釋放實驗檢測不同時間牛血清白蛋白吸光度,作齣牛血清白蛋白釋放麯線;將角質細胞生長因子納米微囊交聯于脫細胞真皮錶麵,製成荷載角質細胞生長因子納米微囊脫細胞真皮(KGF-ADM),在掃描電鏡下觀察微囊形態、分佈及其與脫細胞真皮連接情況;採用Ⅰ型膠原酶複閤胰蛋白酶消化的方法,從門診健康患者無菌手術切除的包皮組織中穫取錶皮細胞單細胞懸液,經免疫熒光檢測,證實其中含錶皮榦細胞,將錶皮榦細胞群分彆接種于KGF-ADM及聚乳痠-羥基乙痠共聚物上,于恆溫箱中培養3 d後,在掃描電鏡下觀察細胞形態、生長情況及其與材料連接情況.結果:①納米微囊成毬率為85%,載藥量為17.3%,包封率為73.5%.②納米微囊中牛血清白蛋白可以控製緩慢釋放,其釋放麯線顯示初期釋放速度較快(前5 d纍計釋放約40%),後進入緩慢釋放期(30 d纍計釋放約75%).③掃描電鏡檢測顯示納米微囊形態規則,在KGF-ADM錶麵分佈均勻,與KGF-ADM聯接良好,部分分佈于KGF-ADM深麵;錶皮榦細胞群在KGF-ADM上生長活躍,細胞形態良好,部分形成剋隆.結論:採用該方法可成功構建荷載角質細胞生長因子納米微囊的新型組織工程化皮膚.
목적:구건일충하재유각질세포생장인자차능공제석방적신형조직공정화피부.방법:실험우2006-03/12우중산대학부속제이의원간세포연구중심급중산대학고분자연구소진행.①재료:각질세포생장인자(CytolLAB공사),우혈청백단백(Amresco공사),취유산-간기을산공취물(유중산대학고분자화학연구소합성,취유산여취간기을산마이비위75:25,상대분자질량위50 000),탈세포진피(북경걸아래복생물기술유한공사).②방법:채용초성유화-용제휘발급저온간조방법,장각질세포생장인자이우혈청백단백작련접포과재취유산-간기을산공취물내제성납미미낭,근거공식계산미낭성구솔、재약량급포봉솔;장미낭용해우이록갑완중,진행체외석방실험검측불동시간우혈청백단백흡광도,작출우혈청백단백석방곡선;장각질세포생장인자납미미낭교련우탈세포진피표면,제성하재각질세포생장인자납미미낭탈세포진피(KGF-ADM),재소묘전경하관찰미낭형태、분포급기여탈세포진피련접정황;채용Ⅰ형효원매복합이단백매소화적방법,종문진건강환자무균수술절제적포피조직중획취표피세포단세포현액,경면역형광검측,증실기중함표피간세포,장표피간세포군분별접충우KGF-ADM급취유산-간기을산공취물상,우항온상중배양3 d후,재소묘전경하관찰세포형태、생장정황급기여재료련접정황.결과:①납미미낭성구솔위85%,재약량위17.3%,포봉솔위73.5%.②납미미낭중우혈청백단백가이공제완만석방,기석방곡선현시초기석방속도교쾌(전5 d루계석방약40%),후진입완만석방기(30 d루계석방약75%).③소묘전경검측현시납미미낭형태규칙,재KGF-ADM표면분포균균,여KGF-ADM련접량호,부분분포우KGF-ADM심면;표피간세포군재KGF-ADM상생장활약,세포형태량호,부분형성극륭.결론:채용해방법가성공구건하재각질세포생장인자납미미낭적신형조직공정화피부.
