CAJ | 학술논문

背景:间充质干细胞的免疫抑制作用近年来逐渐得到证实并开始应用丁临床,但相关研究成果主要来源于体外细胞实验.目的:观察同种异基因大鼠骨髓间充质干细胞从静脉输入后对体内CD4+CD25+调节性干细胞的影响.-设计、时间及地点:以动物为对象的对照观察实验,于2008-03/09在南方医科大学珠江医院移植免疫研究所完成.材料:Wistar大鼠6只用于制备骨髓间充质干细胞,SD大鼠20只作为输注骨髓间充质干细胞的受体鼠.方法:从Wistar大鼠骨髓分离培养间充质干细胞,取第3～5代细胞进行实验.①体外淋巴细胞增殖实验:首先将间充质干细胞悬液从尾静脉注入SD大鼠体内10 d后脱臼处死,取大鼠脾脏制备脾淋巴细胞.实验分5组:分别为脾淋巴细胞/骨髓间充质干细胞为1:10,1:50,1:100+ConA 5 μg组,脾淋巴细胞+ConA 5μg组(增殖组),单纯淋巴细胞组(空白组),检测共培养体系中CD4+CD25+/CD4+T淋巴细胞比率.②体内注射骨髓间充质干细胞实验:将5×109L-1,5×108 L-1,5×107L-1间充质干细胞及PBS静脉输入SD大鼠体内,10 d后取受体鼠胸腺、脾脏、外周血检测CD4+CD25+/CD4+T淋巴细胞比率.主要观察指标:①淋巴细胞增殖体系中CD4+CD25+CD4+比率的变化.②SD大鼠胸腺、脾脏、外周血CD4+CD25+/CD4+比率的变化.结果:①体外淋巴细胞共培养体系中,1:10组T细胞亚群CD4+CD25+/CD4+细胞百分率较增殖组显著升高(P<0.01).②体内输注间充质干细胞达5×109L-1的受体鼠外周血和脾脏CD4+CD25+/CD4+T细胞比率上升,与输注PBS组相比有显著差异(P<0.05),而在胸腺中各组比率无明显差异.结论:岛浓度同种异基因大鼠间充质干细胞不仪可以在体外实验中增加CD4+CD25+/CD4+T细胞比率,静脉输入后仍具有相同作用.
배경:간충질간세포적면역억제작용근년래축점득도증실병개시응용정림상,단상관연구성과주요래원우체외세포실험.목적:관찰동충이기인대서골수간충질간세포종정맥수입후대체내CD4+CD25+조절성간세포적영향.-설계、시간급지점:이동물위대상적대조관찰실험,우2008-03/09재남방의과대학주강의원이식면역연구소완성.재료:Wistar대서6지용우제비골수간충질간세포,SD대서20지작위수주골수간충질간세포적수체서.방법:종Wistar대서골수분리배양간충질간세포,취제3～5대세포진행실험.①체외림파세포증식실험:수선장간충질간세포현액종미정맥주입SD대서체내10 d후탈구처사,취대서비장제비비림파세포.실험분5조:분별위비림파세포/골수간충질간세포위1:10,1:50,1:100+ConA 5 μg조,비림파세포+ConA 5μg조(증식조),단순림파세포조(공백조),검측공배양체계중CD4+CD25+/CD4+T림파세포비솔.②체내주사골수간충질간세포실험:장5×109L-1,5×108 L-1,5×107L-1간충질간세포급PBS정맥수입SD대서체내,10 d후취수체서흉선、비장、외주혈검측CD4+CD25+/CD4+T림파세포비솔.주요관찰지표:①림파세포증식체계중CD4+CD25+CD4+비솔적변화.②SD대서흉선、비장、외주혈CD4+CD25+/CD4+비솔적변화.결과:①체외림파세포공배양체계중,1:10조T세포아군CD4+CD25+/CD4+세포백분솔교증식조현저승고(P<0.01).②체내수주간충질간세포체5×109L-1적수체서외주혈화비장CD4+CD25+/CD4+T세포비솔상승,여수주PBS조상비유현저차이(P<0.05),이재흉선중각조비솔무명현차이.결론:도농도동충이기인대서간충질간세포불의가이재체외실험중증가CD4+CD25+/CD4+T세포비솔,정맥수입후잉구유상동작용.