中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2003年
2期
115-118
,共4页
陈红英%苟克勉%王晓琳%陈学进%黄秀英%孙方臻
陳紅英%茍剋勉%王曉琳%陳學進%黃秀英%孫方臻
진홍영%구극면%왕효림%진학진%황수영%손방진
人血栓调节蛋白%表达%转基因小鼠%异种移植
人血栓調節蛋白%錶達%轉基因小鼠%異種移植
인혈전조절단백%표체%전기인소서%이충이식
用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白(hTM)基因,将其克隆到带有人EF-1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上,得到表达质粒pEF-TM.在转染pEF-TM的COS-1细胞中,hTM得到了瞬时表达,并且正确地定位到细胞膜上.用pEF-TM转染猪内皮细胞(PEC),经G418筛选得到稳定转染的克隆.凝血活性测定结果显示,表达hTM的PEC凝血时间明显延长,表明其抗凝血能力增强.通过显微注射方法,得到了1只F0代hTM转基因小鼠.Southern杂交结果表明,该转基因小鼠整合了9个拷贝的pEF-TM DNA,并能将外源DNA遗传给后代.
用PCR方法從人的基因組DNA中擴增瞭人血栓調節蛋白(hTM)基因,將其剋隆到帶有人EF-1α啟動子的pEF-neo哺乳動物錶達載體上,得到錶達質粒pEF-TM.在轉染pEF-TM的COS-1細胞中,hTM得到瞭瞬時錶達,併且正確地定位到細胞膜上.用pEF-TM轉染豬內皮細胞(PEC),經G418篩選得到穩定轉染的剋隆.凝血活性測定結果顯示,錶達hTM的PEC凝血時間明顯延長,錶明其抗凝血能力增彊.通過顯微註射方法,得到瞭1隻F0代hTM轉基因小鼠.Southern雜交結果錶明,該轉基因小鼠整閤瞭9箇拷貝的pEF-TM DNA,併能將外源DNA遺傳給後代.
용PCR방법종인적기인조DNA중확증료인혈전조절단백(hTM)기인,장기극륭도대유인EF-1α계동자적pEF-neo포유동물표체재체상,득도표체질립pEF-TM.재전염pEF-TM적COS-1세포중,hTM득도료순시표체,병차정학지정위도세포막상.용pEF-TM전염저내피세포(PEC),경G418사선득도은정전염적극륭.응혈활성측정결과현시,표체hTM적PEC응혈시간명현연장,표명기항응혈능력증강.통과현미주사방법,득도료1지F0대hTM전기인소서.Southern잡교결과표명,해전기인소서정합료9개고패적pEF-TM DNA,병능장외원DNA유전급후대.
