青岛农业大学学报（自然科学版）
青島農業大學學報（自然科學版）
청도농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF QINGDAO AGRICULTURAL UNIVERSITY
2009年
4期
325-329
,共5页
林明敏%朱香萍%李美玉%衣瑞玲
林明敏%硃香萍%李美玉%衣瑞玲
림명민%주향평%리미옥%의서령
石鲽%外周血细胞培养%染色体制片
石鰈%外週血細胞培養%染色體製片
석접%외주혈세포배양%염색체제편
以石鲽(Kareius bicoloratus)为试验材料研究探讨其外周血细胞培养及染色体制备的条件方法.用RPMI 1640全血培养基进行培养,从血液保存时间、刺激源PHA(植物血球凝集素)和ConA(刀豆蛋白A)等方面对外周血淋巴细胞的培养及其染色体制备条件进行探讨,建立较成熟的石鲽外周血淋巴细胞培养及染色体制备的方法.结果表明: 血液于4℃保存3d后用全血培养基进行培养,细胞仍可正常生长;在 16℃培养温度下, ConA和PHA两种刺激源均能促进石鲽外周血淋巴细胞的分裂增殖,培养时间以 72h最好;从培养的血细胞形态和白细胞数目来看,以ConA为刺激源的作用效果好于以PHA为刺激源的作用效果;5ml培养基中加入0.2ml全血,16℃下用终浓度为0.1mg/ml的ConA为刺激源培养72h,在结束培养前4h加入终浓度0.6μg/ml秋水仙素,0.075mol/L的氯化钾低渗35min可获得较好的染色体分裂相.
以石鰈(Kareius bicoloratus)為試驗材料研究探討其外週血細胞培養及染色體製備的條件方法.用RPMI 1640全血培養基進行培養,從血液保存時間、刺激源PHA(植物血毬凝集素)和ConA(刀豆蛋白A)等方麵對外週血淋巴細胞的培養及其染色體製備條件進行探討,建立較成熟的石鰈外週血淋巴細胞培養及染色體製備的方法.結果錶明: 血液于4℃保存3d後用全血培養基進行培養,細胞仍可正常生長;在 16℃培養溫度下, ConA和PHA兩種刺激源均能促進石鰈外週血淋巴細胞的分裂增殖,培養時間以 72h最好;從培養的血細胞形態和白細胞數目來看,以ConA為刺激源的作用效果好于以PHA為刺激源的作用效果;5ml培養基中加入0.2ml全血,16℃下用終濃度為0.1mg/ml的ConA為刺激源培養72h,在結束培養前4h加入終濃度0.6μg/ml鞦水仙素,0.075mol/L的氯化鉀低滲35min可穫得較好的染色體分裂相.
이석접(Kareius bicoloratus)위시험재료연구탐토기외주혈세포배양급염색체제비적조건방법.용RPMI 1640전혈배양기진행배양,종혈액보존시간、자격원PHA(식물혈구응집소)화ConA(도두단백A)등방면대외주혈림파세포적배양급기염색체제비조건진행탐토,건립교성숙적석접외주혈림파세포배양급염색체제비적방법.결과표명: 혈액우4℃보존3d후용전혈배양기진행배양,세포잉가정상생장;재 16℃배양온도하, ConA화PHA량충자격원균능촉진석접외주혈림파세포적분렬증식,배양시간이 72h최호;종배양적혈세포형태화백세포수목래간,이ConA위자격원적작용효과호우이PHA위자격원적작용효과;5ml배양기중가입0.2ml전혈,16℃하용종농도위0.1mg/ml적ConA위자격원배양72h,재결속배양전4h가입종농도0.6μg/ml추수선소,0.075mol/L적록화갑저삼35min가획득교호적염색체분렬상.
