世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2010年
3期
250-255
,共6页
冯建勋%腊晓林%马艳%毕晓娟%温浩
馮建勛%臘曉林%馬豔%畢曉娟%溫浩
풍건훈%석효림%마염%필효연%온호
羊水细胞%间充质干细胞%神经样细胞%大鼠%流式细胞术%免疫细胞化学%碱性成纤维细胞生长因子%重组表皮生长因子
羊水細胞%間充質榦細胞%神經樣細胞%大鼠%流式細胞術%免疫細胞化學%堿性成纖維細胞生長因子%重組錶皮生長因子
양수세포%간충질간세포%신경양세포%대서%류식세포술%면역세포화학%감성성섬유세포생장인자%중조표피생장인자
目的:探讨体外诱导羊水间充质干细胞(AF-MSCs)分化成神经干细胞.方法:10只SD怀孕大鼠,180-240 g,胎龄16d,过量腹腔麻醉致死,开腹全部切除子宫,在无菌的条件下抽取全羊水,采用贴壁法分离AF-MSCs,体外培养扩增,观察细胞生长特性,流式细胞仪检测AF-MSCs表面抗原表达及细胞周期.取第3代AF-MSCs,加入预诱导液(DMEM/F12、100 mL/L FBS、1 mmol/Lβ-MEM)诱导24 h,然后加入诱导液(DMEM/F12、100 mL/L FBS、5 mmol/L β-MEM)诱导24 h,最后在分化维持培养液(DMEM/F12、20μg/L EGF、20μg/L bFGF)中培养,行免疫荧光染色,检测NSE和GFAP的表达.结果:成功分离、培养和传代SD大鼠AF-MSCs,流式细胞术检测提示大鼠AF-MSCs的G0/G1期细胞比例约为87.5%、S+G2+M期比例为12.5%,表达CD44为98.3%、GD29为70%、和CD105为33.2%、不表达CD45为0.5%,CD34为1%,DLA-DR(MHC class Ⅱ)为0.1%.诱导后,AF-MSCs能表达神经细胞标示物NSE和GFAP,且可在体外继续存活2 wk左右.结论:羊水中也存在MSCs,与其他来源的MSCs特点相符:羊水可以作为一种新的胎儿MSCs来源,而且能在体外诱导分化为神经细胞.
目的:探討體外誘導羊水間充質榦細胞(AF-MSCs)分化成神經榦細胞.方法:10隻SD懷孕大鼠,180-240 g,胎齡16d,過量腹腔痳醉緻死,開腹全部切除子宮,在無菌的條件下抽取全羊水,採用貼壁法分離AF-MSCs,體外培養擴增,觀察細胞生長特性,流式細胞儀檢測AF-MSCs錶麵抗原錶達及細胞週期.取第3代AF-MSCs,加入預誘導液(DMEM/F12、100 mL/L FBS、1 mmol/Lβ-MEM)誘導24 h,然後加入誘導液(DMEM/F12、100 mL/L FBS、5 mmol/L β-MEM)誘導24 h,最後在分化維持培養液(DMEM/F12、20μg/L EGF、20μg/L bFGF)中培養,行免疫熒光染色,檢測NSE和GFAP的錶達.結果:成功分離、培養和傳代SD大鼠AF-MSCs,流式細胞術檢測提示大鼠AF-MSCs的G0/G1期細胞比例約為87.5%、S+G2+M期比例為12.5%,錶達CD44為98.3%、GD29為70%、和CD105為33.2%、不錶達CD45為0.5%,CD34為1%,DLA-DR(MHC class Ⅱ)為0.1%.誘導後,AF-MSCs能錶達神經細胞標示物NSE和GFAP,且可在體外繼續存活2 wk左右.結論:羊水中也存在MSCs,與其他來源的MSCs特點相符:羊水可以作為一種新的胎兒MSCs來源,而且能在體外誘導分化為神經細胞.
목적:탐토체외유도양수간충질간세포(AF-MSCs)분화성신경간세포.방법:10지SD부잉대서,180-240 g,태령16d,과량복강마취치사,개복전부절제자궁,재무균적조건하추취전양수,채용첩벽법분리AF-MSCs,체외배양확증,관찰세포생장특성,류식세포의검측AF-MSCs표면항원표체급세포주기.취제3대AF-MSCs,가입예유도액(DMEM/F12、100 mL/L FBS、1 mmol/Lβ-MEM)유도24 h,연후가입유도액(DMEM/F12、100 mL/L FBS、5 mmol/L β-MEM)유도24 h,최후재분화유지배양액(DMEM/F12、20μg/L EGF、20μg/L bFGF)중배양,행면역형광염색,검측NSE화GFAP적표체.결과:성공분리、배양화전대SD대서AF-MSCs,류식세포술검측제시대서AF-MSCs적G0/G1기세포비례약위87.5%、S+G2+M기비례위12.5%,표체CD44위98.3%、GD29위70%、화CD105위33.2%、불표체CD45위0.5%,CD34위1%,DLA-DR(MHC class Ⅱ)위0.1%.유도후,AF-MSCs능표체신경세포표시물NSE화GFAP,차가재체외계속존활2 wk좌우.결론:양수중야존재MSCs,여기타래원적MSCs특점상부:양수가이작위일충신적태인MSCs래원,이차능재체외유도분화위신경세포.
