中国皮肤性病学杂志
中國皮膚性病學雜誌
중국피부성병학잡지
THE CHINESE JOURNAL OF DERMATOVENEREOLOGY
2010年
3期
199-202
,共4页
陈晓黎%周乐%闫小飞%杨军%郑谨%王一理
陳曉黎%週樂%閆小飛%楊軍%鄭謹%王一理
진효려%주악%염소비%양군%정근%왕일리
人乳头瘤病毒%表达%纯化%相互作用
人乳頭瘤病毒%錶達%純化%相互作用
인유두류병독%표체%순화%상호작용
目的 筛选人类乳头瘤病毒(HPV)18E7相互作用蛋白质,为进一步研究HPV18E7的功能及致癌机理提供线索.方法 通过基因工程技术体外构建表达载体,诱导可溶性GST-HPV18E7融合蛋白的高效表达,glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化,利用GST-pulldown 方法初步筛选与HPV18E7结合的蛋白质,并经双向电泳分离,质谱分析,用Mascot软件在蛋白质数据库中进行检索并鉴定.结果 纯化的GST-HPV18E7融合蛋白与CHO细胞相互作用后,捕获到与HPV18E7作用的蛋白质,经双向电泳分离得到分辨率较好的图谱,并对其中的26个蛋白质点进行分析,初步鉴定出19个涉及参与细胞的增殖、分化、细胞周期调控、免疫调节及物质代谢等方面的蛋白质.结论 所鉴定出的与HPV18E7相互作用的蛋白质,有望成为今后研究HPV致癌机理及抗病毒治疗的候选靶蛋白.
目的 篩選人類乳頭瘤病毒(HPV)18E7相互作用蛋白質,為進一步研究HPV18E7的功能及緻癌機理提供線索.方法 通過基因工程技術體外構建錶達載體,誘導可溶性GST-HPV18E7融閤蛋白的高效錶達,glutathione Sepharose 4B親和層析純化,利用GST-pulldown 方法初步篩選與HPV18E7結閤的蛋白質,併經雙嚮電泳分離,質譜分析,用Mascot軟件在蛋白質數據庫中進行檢索併鑒定.結果 純化的GST-HPV18E7融閤蛋白與CHO細胞相互作用後,捕穫到與HPV18E7作用的蛋白質,經雙嚮電泳分離得到分辨率較好的圖譜,併對其中的26箇蛋白質點進行分析,初步鑒定齣19箇涉及參與細胞的增殖、分化、細胞週期調控、免疫調節及物質代謝等方麵的蛋白質.結論 所鑒定齣的與HPV18E7相互作用的蛋白質,有望成為今後研究HPV緻癌機理及抗病毒治療的候選靶蛋白.
목적 사선인류유두류병독(HPV)18E7상호작용단백질,위진일보연구HPV18E7적공능급치암궤리제공선색.방법 통과기인공정기술체외구건표체재체,유도가용성GST-HPV18E7융합단백적고효표체,glutathione Sepharose 4B친화층석순화,이용GST-pulldown 방법초보사선여HPV18E7결합적단백질,병경쌍향전영분리,질보분석,용Mascot연건재단백질수거고중진행검색병감정.결과 순화적GST-HPV18E7융합단백여CHO세포상호작용후,포획도여HPV18E7작용적단백질,경쌍향전영분리득도분변솔교호적도보,병대기중적26개단백질점진행분석,초보감정출19개섭급삼여세포적증식、분화、세포주기조공、면역조절급물질대사등방면적단백질.결론 소감정출적여HPV18E7상호작용적단백질,유망성위금후연구HPV치암궤리급항병독치료적후선파단백.
