解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2010年
6期
519-522
,共4页
孙晓冬%董韬%刘春玲%董建将%李静%张羽飞%武艳
孫曉鼕%董韜%劉春玲%董建將%李靜%張羽飛%武豔
손효동%동도%류춘령%동건장%리정%장우비%무염
胚胎干细胞%悬浮培养%拟胚体%淫羊藿苷%心肌合胞体%昆明小鼠
胚胎榦細胞%懸浮培養%擬胚體%淫羊藿苷%心肌閤胞體%昆明小鼠
배태간세포%현부배양%의배체%음양곽감%심기합포체%곤명소서
目的 饲养层制作及复苏培养昆明小鼠胚胎干细胞,探索体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化.方法 饲养层制作,复苏及体外培养胚胎干细胞,采用一步法消化贴壁胚胎干细胞,悬浮培养5d,形成拟胚体(EB),待EB贴壁后,加入淫羊藿苷(Icraiin,ICA)诱导液对其诱导并每天观察,免疫荧光检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T(cTnT)和心室肌球蛋白轻链(MLC-2v)的表达.结果 胚胎干细胞悬浮聚集5d,形成类似球状的拟胚体,将拟胚体贴壁诱导8d,发现拟胚体中出现跳动,诱导后10d拟胚体跳动率达65%,显著高于空白对照组和阴性对照组,一个分化拟胚体中一般出现1-3个跳动点,节律约为50-80times/min,在诱导10d时跳动的合胞体,免疫荧光表明cTnT和MLC-2v表达为阳性.结论 胚胎干细胞经悬浮聚集培养5d后经10-7mol/L淫羊藿苷诱导,得到了可以跳动的心肌细胞团.
目的 飼養層製作及複囌培養昆明小鼠胚胎榦細胞,探索體外誘導胚胎榦細胞嚮心肌細胞分化.方法 飼養層製作,複囌及體外培養胚胎榦細胞,採用一步法消化貼壁胚胎榦細胞,懸浮培養5d,形成擬胚體(EB),待EB貼壁後,加入淫羊藿苷(Icraiin,ICA)誘導液對其誘導併每天觀察,免疫熒光檢測心肌細胞特異性肌鈣蛋白T(cTnT)和心室肌毬蛋白輕鏈(MLC-2v)的錶達.結果 胚胎榦細胞懸浮聚集5d,形成類似毬狀的擬胚體,將擬胚體貼壁誘導8d,髮現擬胚體中齣現跳動,誘導後10d擬胚體跳動率達65%,顯著高于空白對照組和陰性對照組,一箇分化擬胚體中一般齣現1-3箇跳動點,節律約為50-80times/min,在誘導10d時跳動的閤胞體,免疫熒光錶明cTnT和MLC-2v錶達為暘性.結論 胚胎榦細胞經懸浮聚集培養5d後經10-7mol/L淫羊藿苷誘導,得到瞭可以跳動的心肌細胞糰.
목적 사양층제작급복소배양곤명소서배태간세포,탐색체외유도배태간세포향심기세포분화.방법 사양층제작,복소급체외배양배태간세포,채용일보법소화첩벽배태간세포,현부배양5d,형성의배체(EB),대EB첩벽후,가입음양곽감(Icraiin,ICA)유도액대기유도병매천관찰,면역형광검측심기세포특이성기개단백T(cTnT)화심실기구단백경련(MLC-2v)적표체.결과 배태간세포현부취집5d,형성유사구상적의배체,장의배체첩벽유도8d,발현의배체중출현도동,유도후10d의배체도동솔체65%,현저고우공백대조조화음성대조조,일개분화의배체중일반출현1-3개도동점,절률약위50-80times/min,재유도10d시도동적합포체,면역형광표명cTnT화MLC-2v표체위양성.결론 배태간세포경현부취집배양5d후경10-7mol/L음양곽감유도,득도료가이도동적심기세포단.
