CAJ | 학술논문

目的:设计合成有效的siRNA-CD97,体外转染胃癌细胞株,观察CD97表达改变及其与胃癌细胞株迁移、侵袭能力改变的关系.方法:采用AGS和MGC803胃癌细胞株.针对CD97基因设计siRNA,采用化学法合成,筛选出最有效的siRNA-CD97.siRNA-CD97转染胃癌细胞后分别用real-time RT-PCR、免疫荧光流式细胞术检测CD97 mRNA和蛋白表达的改变,MTT法检测细胞活性的改变,并用Transwell细胞迁移和侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化.结果:在siRNA-CD97转染后48 h,real- time RT-PCR结果显示AGS和MGC803细胞CD97 mRNA的表达量相对于未转染的细胞分别下降了(89.34±9.95)%和(95.42±1.93)%.转染后72 h,流式细胞术结果显示AGS细胞CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(19.29±3.45)%和(30.11±5.93)%,MGC803细胞CD97EGF和CD97stalk抗原的表达强度相对于未转染的细胞分别下降了(26.25±5.73)%和(16.22±3.23)%.MTT法检测结果显示,siRNA-CD97转染前后细胞的吸光度值没有显著差异.迁移和侵袭实验结果显示,AGS细胞siRNA-CD97转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(67.63±12.03)%和(68.02±15.63)%,MGC803细胞转染组迁移和侵袭细胞相对于未转染组分别下降了(14.92±2.03)%和(22.09±5.43)%.结论:胃癌细胞转染 siRNA-CD97能够抑制CD97 mRNA和蛋白表达,随着CD97表达的降低,细胞迁移和转移的能力也明显减弱.
목적:설계합성유효적siRNA-CD97,체외전염위암세포주,관찰CD97표체개변급기여위암세포주천이、침습능력개변적관계.방법:채용AGS화MGC803위암세포주.침대CD97기인설계siRNA,채용화학법합성,사선출최유효적siRNA-CD97.siRNA-CD97전염위암세포후분별용real-time RT-PCR、면역형광류식세포술검측CD97 mRNA화단백표체적개변,MTT법검측세포활성적개변,병용Transwell세포천이화침습실험검측세포천이화침습능력적변화.결과:재siRNA-CD97전염후48 h,real- time RT-PCR결과현시AGS화MGC803세포CD97 mRNA적표체량상대우미전염적세포분별하강료(89.34±9.95)%화(95.42±1.93)%.전염후72 h,류식세포술결과현시AGS세포CD97EGF화CD97stalk항원적표체강도상대우미전염적세포분별하강료(19.29±3.45)%화(30.11±5.93)%,MGC803세포CD97EGF화CD97stalk항원적표체강도상대우미전염적세포분별하강료(26.25±5.73)%화(16.22±3.23)%.MTT법검측결과현시,siRNA-CD97전염전후세포적흡광도치몰유현저차이.천이화침습실험결과현시,AGS세포siRNA-CD97전염조천이화침습세포상대우미전염조분별하강료(67.63±12.03)%화(68.02±15.63)%,MGC803세포전염조천이화침습세포상대우미전염조분별하강료(14.92±2.03)%화(22.09±5.43)%.결론:위암세포전염 siRNA-CD97능구억제CD97 mRNA화단백표체,수착CD97표체적강저,세포천이화전이적능력야명현감약.