重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2011年
7期
785-789
,共5页
王兰%喻依川%傅雷华%胡成琳%陈林
王蘭%喻依川%傅雷華%鬍成琳%陳林
왕란%유의천%부뢰화%호성림%진림
硼替佐米%TF-1细胞株%细胞凋亡%Sall4基因
硼替佐米%TF-1細胞株%細胞凋亡%Sall4基因
붕체좌미%TF-1세포주%세포조망%Sall4기인
目的:探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib)诱导人红系白血病细胞株TF-1凋亡的作用,及其对Sall4基因表达水平的影响.方法:(1)MTT法检测细胞增殖抑制率.(2)光学显微镜观察细胞的形态学改变.(3)电镜观察超微结构变化.(4)流式细胞仪检测Annexin V-FITC细胞凋亡率.(5)流式细胞仪分析细胞周期.(6)RT-PCR检测Sall4 mRNA的表达水平.结果:(1)硼替佐米呈时间和剂量依赖性抑制TF-1细胞生长,与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).24h和48 h的药物半数抑制浓度(Halfmaximal inhibitory concentration of a substance,IC50)分别为52 nmol/L和27 nmol/L.(2)显微镜下观察细胞皱缩变小,细胞密度明显下降.(3)电镜下观察可见凋亡小体.(4)Annexin V-FITC检测显示随着硼替佐米作用浓度的增加,凋亡率增加,呈剂量依赖关系(P＜0.05).(5)流式细胞仪分析细胞周期,随着硼替佐米作用时间的增加,G2/M期细胞比例逐渐增高,而Go/G1和S期细胞比例则逐渐减少,呈时间依赖关系(P＜0.05).(6)RT-PCR结果示Sall4基因在TF-1细胞上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加,Sall4 mRNA与β-actin mRNA表达量的积分光密度比值(Integral optical density ratio,V/B)水平下降(P＜0.05).结论:硼替佐米能抑制TF-1细胞增殖,诱导其凋亡,呈时间-剂量依赖关系.Sall4基因在TF-1细胞株上高表达,并随着硼替佐米作用浓度和时间的增加表达水平下降,呈时间-剂量依赖关系.
目的:探討蛋白酶體抑製劑硼替佐米(Bortezomib)誘導人紅繫白血病細胞株TF-1凋亡的作用,及其對Sall4基因錶達水平的影響.方法:(1)MTT法檢測細胞增殖抑製率.(2)光學顯微鏡觀察細胞的形態學改變.(3)電鏡觀察超微結構變化.(4)流式細胞儀檢測Annexin V-FITC細胞凋亡率.(5)流式細胞儀分析細胞週期.(6)RT-PCR檢測Sall4 mRNA的錶達水平.結果:(1)硼替佐米呈時間和劑量依賴性抑製TF-1細胞生長,與對照組相比,差異有統計學意義(P＜0.05).24h和48 h的藥物半數抑製濃度(Halfmaximal inhibitory concentration of a substance,IC50)分彆為52 nmol/L和27 nmol/L.(2)顯微鏡下觀察細胞皺縮變小,細胞密度明顯下降.(3)電鏡下觀察可見凋亡小體.(4)Annexin V-FITC檢測顯示隨著硼替佐米作用濃度的增加,凋亡率增加,呈劑量依賴關繫(P＜0.05).(5)流式細胞儀分析細胞週期,隨著硼替佐米作用時間的增加,G2/M期細胞比例逐漸增高,而Go/G1和S期細胞比例則逐漸減少,呈時間依賴關繫(P＜0.05).(6)RT-PCR結果示Sall4基因在TF-1細胞上高錶達,併隨著硼替佐米作用濃度和時間的增加,Sall4 mRNA與β-actin mRNA錶達量的積分光密度比值(Integral optical density ratio,V/B)水平下降(P＜0.05).結論:硼替佐米能抑製TF-1細胞增殖,誘導其凋亡,呈時間-劑量依賴關繫.Sall4基因在TF-1細胞株上高錶達,併隨著硼替佐米作用濃度和時間的增加錶達水平下降,呈時間-劑量依賴關繫.
목적:탐토단백매체억제제붕체좌미(Bortezomib)유도인홍계백혈병세포주TF-1조망적작용,급기대Sall4기인표체수평적영향.방법:(1)MTT법검측세포증식억제솔.(2)광학현미경관찰세포적형태학개변.(3)전경관찰초미결구변화.(4)류식세포의검측Annexin V-FITC세포조망솔.(5)류식세포의분석세포주기.(6)RT-PCR검측Sall4 mRNA적표체수평.결과:(1)붕체좌미정시간화제량의뢰성억제TF-1세포생장,여대조조상비,차이유통계학의의(P＜0.05).24h화48 h적약물반수억제농도(Halfmaximal inhibitory concentration of a substance,IC50)분별위52 nmol/L화27 nmol/L.(2)현미경하관찰세포추축변소,세포밀도명현하강.(3)전경하관찰가견조망소체.(4)Annexin V-FITC검측현시수착붕체좌미작용농도적증가,조망솔증가,정제량의뢰관계(P＜0.05).(5)류식세포의분석세포주기,수착붕체좌미작용시간적증가,G2/M기세포비례축점증고,이Go/G1화S기세포비례칙축점감소,정시간의뢰관계(P＜0.05).(6)RT-PCR결과시Sall4기인재TF-1세포상고표체,병수착붕체좌미작용농도화시간적증가,Sall4 mRNA여β-actin mRNA표체량적적분광밀도비치(Integral optical density ratio,V/B)수평하강(P＜0.05).결론:붕체좌미능억제TF-1세포증식,유도기조망,정시간-제량의뢰관계.Sall4기인재TF-1세포주상고표체,병수착붕체좌미작용농도화시간적증가표체수평하강,정시간-제량의뢰관계.
