棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2011年
4期
311-316
,共6页
彭珍子%赵燕%曾潜%黄丽华%陈浩东%李育强%张学文
彭珍子%趙燕%曾潛%黃麗華%陳浩東%李育彊%張學文
팽진자%조연%증잠%황려화%진호동%리육강%장학문
棉花%农杆菌%子房注射%转化率
棉花%農桿菌%子房註射%轉化率
면화%농간균%자방주사%전화솔
采用根癌农杆菌直接注射子房,对8个棉花栽培品种进行活体方式的遗传转化.为了确立注射细菌的适宜时期,先采用含考马斯亮蓝染料的菌液对授粉前3d(-3 DPA,days post-anthesis)至授粉后2d(2DPA)的棉花子房进行注射,观察到细菌(染料)可以在-2 DPA至授粉后24h之间进入子房.为了避免注射对花柱的损伤并影响授粉,选取授粉后24h已完成受精的子房,利用微量注射器经花柱将10μL约含1000个细菌细胞的农杆菌菌液注入子房.对8个棉花品种转化结果表明,该方法可以有效转化棉花.种子成熟后田间播种,经卡那霉素抗性筛选及PCR(Polymerase chain reaction)分子检测,转基因效率平均为2.78%,转化效率与受体的基因型无明显的相关性,相对组织培养的农杆菌转化法和DNA子房注射法有一定的优势.
採用根癌農桿菌直接註射子房,對8箇棉花栽培品種進行活體方式的遺傳轉化.為瞭確立註射細菌的適宜時期,先採用含攷馬斯亮藍染料的菌液對授粉前3d(-3 DPA,days post-anthesis)至授粉後2d(2DPA)的棉花子房進行註射,觀察到細菌(染料)可以在-2 DPA至授粉後24h之間進入子房.為瞭避免註射對花柱的損傷併影響授粉,選取授粉後24h已完成受精的子房,利用微量註射器經花柱將10μL約含1000箇細菌細胞的農桿菌菌液註入子房.對8箇棉花品種轉化結果錶明,該方法可以有效轉化棉花.種子成熟後田間播種,經卡那黴素抗性篩選及PCR(Polymerase chain reaction)分子檢測,轉基因效率平均為2.78%,轉化效率與受體的基因型無明顯的相關性,相對組織培養的農桿菌轉化法和DNA子房註射法有一定的優勢.
채용근암농간균직접주사자방,대8개면화재배품충진행활체방식적유전전화.위료학립주사세균적괄의시기,선채용함고마사량람염료적균액대수분전3d(-3 DPA,days post-anthesis)지수분후2d(2DPA)적면화자방진행주사,관찰도세균(염료)가이재-2 DPA지수분후24h지간진입자방.위료피면주사대화주적손상병영향수분,선취수분후24h이완성수정적자방,이용미량주사기경화주장10μL약함1000개세균세포적농간균균액주입자방.대8개면화품충전화결과표명,해방법가이유효전화면화.충자성숙후전간파충,경잡나매소항성사선급PCR(Polymerase chain reaction)분자검측,전기인효솔평균위2.78%,전화효솔여수체적기인형무명현적상관성,상대조직배양적농간균전화법화DNA자방주사법유일정적우세.
