生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
5期
16-22
,共7页
孙廷丽%施庆珊%欧阳友生%谢小保%陈仪本
孫廷麗%施慶珊%歐暘友生%謝小保%陳儀本
손정려%시경산%구양우생%사소보%진의본
地衣芽胞杆菌%透明颤菌血红蛋白%穿梭表达载体%聚γ-谷氨酸
地衣芽胞桿菌%透明顫菌血紅蛋白%穿梭錶達載體%聚γ-穀氨痠
지의아포간균%투명전균혈홍단백%천사표체재체%취γ-곡안산
目的:研究透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在产聚γ-谷氨酸(γ- PGA)的地衣芽孢杆菌ATCC9945a中的表达及对其生物量和产量的影响.方法:以大肠杆菌-枯草芽孢杆菌的穿梭表达载体pUBC19为骨架,构建含有枯草芽孢杆菌的组成型启动子P43和透明颤菌血红蛋白结构基因的穿梭表达载体pUBC19 - PV,并通过电击转化得到重组的产γ-PGA的地衣芽孢杆菌(B.licheniformis).一氧化碳差光谱验证重组B.licheniformis 中是否表达了有活性的血红蛋白.摇瓶发酵试验研究重组菌株和对照菌株生物量和发酵产物产量的变化.结果表明,重组菌株的生长明显比对照菌株快,但是γ - PGA的产量却比原始菌株低:在正常供氧时,其产量12.8g/L,比亲株产量21.7g/L下降了41%,贫氧环境下产量8.8g/L,比亲株产量12.8g/L降低了31%.结论:vgb 在重组菌株中表达了有活性的的透明颤菌血红蛋白,并可以促进细胞的生长,但聚谷氨酸的产量却有所下降.文章针对聚γ-谷氨酸产量的下降原因进行了讨论,并对下一步的工作提出了建议.
目的:研究透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)在產聚γ-穀氨痠(γ- PGA)的地衣芽孢桿菌ATCC9945a中的錶達及對其生物量和產量的影響.方法:以大腸桿菌-枯草芽孢桿菌的穿梭錶達載體pUBC19為骨架,構建含有枯草芽孢桿菌的組成型啟動子P43和透明顫菌血紅蛋白結構基因的穿梭錶達載體pUBC19 - PV,併通過電擊轉化得到重組的產γ-PGA的地衣芽孢桿菌(B.licheniformis).一氧化碳差光譜驗證重組B.licheniformis 中是否錶達瞭有活性的血紅蛋白.搖瓶髮酵試驗研究重組菌株和對照菌株生物量和髮酵產物產量的變化.結果錶明,重組菌株的生長明顯比對照菌株快,但是γ - PGA的產量卻比原始菌株低:在正常供氧時,其產量12.8g/L,比親株產量21.7g/L下降瞭41%,貧氧環境下產量8.8g/L,比親株產量12.8g/L降低瞭31%.結論:vgb 在重組菌株中錶達瞭有活性的的透明顫菌血紅蛋白,併可以促進細胞的生長,但聚穀氨痠的產量卻有所下降.文章針對聚γ-穀氨痠產量的下降原因進行瞭討論,併對下一步的工作提齣瞭建議.
목적:연구투명전균혈홍단백기인(vgb)재산취γ-곡안산(γ- PGA)적지의아포간균ATCC9945a중적표체급대기생물량화산량적영향.방법:이대장간균-고초아포간균적천사표체재체pUBC19위골가,구건함유고초아포간균적조성형계동자P43화투명전균혈홍단백결구기인적천사표체재체pUBC19 - PV,병통과전격전화득도중조적산γ-PGA적지의아포간균(B.licheniformis).일양화탄차광보험증중조B.licheniformis 중시부표체료유활성적혈홍단백.요병발효시험연구중조균주화대조균주생물량화발효산물산량적변화.결과표명,중조균주적생장명현비대조균주쾌,단시γ - PGA적산량각비원시균주저:재정상공양시,기산량12.8g/L,비친주산량21.7g/L하강료41%,빈양배경하산량8.8g/L,비친주산량12.8g/L강저료31%.결론:vgb 재중조균주중표체료유활성적적투명전균혈홍단백,병가이촉진세포적생장,단취곡안산적산량각유소하강.문장침대취γ-곡안산산량적하강원인진행료토론,병대하일보적공작제출료건의.