热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2011年
5期
845-853
,共9页
蔡英卿%赖钟雄%陈义挺%林玉玲%张妙霞%李惠华
蔡英卿%賴鐘雄%陳義挺%林玉玲%張妙霞%李惠華
채영경%뢰종웅%진의정%림옥령%장묘하%리혜화
龙眼胚性愈伤组织%14-3-3基因%克隆%序列分析%实时荧光定量PCR法
龍眼胚性愈傷組織%14-3-3基因%剋隆%序列分析%實時熒光定量PCR法
용안배성유상조직%14-3-3기인%극륭%서렬분석%실시형광정량PCR법
分离克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织14-3-3基因,并分析该基因在龙眼体胚发生过程中的表达情况.采用RT-PCR结合RACE法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的cDNA全长序列和DNA序列,采用TAIL-PCR法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的启动子DNA序列,运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达.结果表明:经克隆得到龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因786 bp的cDNA全长序列(GenBank检索号为GU573765),该cDNA开放阅读框推定的氨基酸序列(含261个氨基酸)与其它植物14-3-3具有较高同源性；该基因的DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为1 859bp,包含3个内含子,内含子的剪切位点均符合真核生物“GT-AG”规则 该基因的启动子DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为910 bp;该基因在龙眼体胚各阶段均有表达,其中在松散型胚性愈伤组织阶段和心形胚及鱼雷形胚阶段呈现高表达,整个变化趋势呈“倒S”状.
分離剋隆龍眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈傷組織14-3-3基因,併分析該基因在龍眼體胚髮生過程中的錶達情況.採用RT-PCR結閤RACE法,穫得龍眼胚性愈傷組織14-3-3基因的cDNA全長序列和DNA序列,採用TAIL-PCR法,穫得龍眼胚性愈傷組織14-3-3基因的啟動子DNA序列,運用生物信息學方法對序列進行分析,併通過實時熒光定量PCR (qRT-PCR)研究該基因在龍眼體胚髮生過程中的錶達.結果錶明:經剋隆得到龍眼胚性愈傷組織14-3-3基因786 bp的cDNA全長序列(GenBank檢索號為GU573765),該cDNA開放閱讀框推定的氨基痠序列(含261箇氨基痠)與其它植物14-3-3具有較高同源性；該基因的DNA序列(GenBank檢索號為GU573766)長為1 859bp,包含3箇內含子,內含子的剪切位點均符閤真覈生物“GT-AG”規則 該基因的啟動子DNA序列(GenBank檢索號為GU573766)長為910 bp;該基因在龍眼體胚各階段均有錶達,其中在鬆散型胚性愈傷組織階段和心形胚及魚雷形胚階段呈現高錶達,整箇變化趨勢呈“倒S”狀.
분리극륭용안(Dimocarpus longan Lour.)배성유상조직14-3-3기인,병분석해기인재용안체배발생과정중적표체정황.채용RT-PCR결합RACE법,획득용안배성유상조직14-3-3기인적cDNA전장서렬화DNA서렬,채용TAIL-PCR법,획득용안배성유상조직14-3-3기인적계동자DNA서렬,운용생물신식학방법대서렬진행분석,병통과실시형광정량PCR (qRT-PCR)연구해기인재용안체배발생과정중적표체.결과표명:경극륭득도용안배성유상조직14-3-3기인786 bp적cDNA전장서렬(GenBank검색호위GU573765),해cDNA개방열독광추정적안기산서렬(함261개안기산)여기타식물14-3-3구유교고동원성；해기인적DNA서렬(GenBank검색호위GU573766)장위1 859bp,포함3개내함자,내함자적전절위점균부합진핵생물“GT-AG”규칙 해기인적계동자DNA서렬(GenBank검색호위GU573766)장위910 bp;해기인재용안체배각계단균유표체,기중재송산형배성유상조직계단화심형배급어뢰형배계단정현고표체,정개변화추세정“도S”상.
