临床肿瘤学杂志
臨床腫瘤學雜誌
림상종류학잡지
CHINESE CLINICAL ONCOLOGY
2012年
2期
97-101
,共5页
刘晓静%徐建明%宋三泰%师明磊%张彦%王洋
劉曉靜%徐建明%宋三泰%師明磊%張彥%王洋
류효정%서건명%송삼태%사명뢰%장언%왕양
肽核酸%结肠癌%K-Ras基因%西妥昔单抗%个体化治疗
肽覈痠%結腸癌%K-Ras基因%西妥昔單抗%箇體化治療
태핵산%결장암%K-Ras기인%서타석단항%개체화치료
目的 优化建立一种敏感、简便、稳定地检测结肠癌患者K-Ras基因突变的方法.方法 构建K-Ras基因第二外显子12、13密码子的野生型及突变型质粒,通过优化PCR及肽核酸与特异性引物的浓度关系,达到有效模板浓度低的样品K-Ras基因突变的检测.结果 成功构建K-Ras基因第二外显子12、13密码子的野生型和突变型质粒.肽核酸钳制PCR条件优化包括:(1)最佳复性温度为58℃和60℃；(2)有效模板浓度为10-6pg/μl；(3)引物浓度与肽核酸浓度的最佳比例为20∶1.在K-Ras突变型质粒与野生型质粒浓度比为1∶100时即可检测到突变.结论 肽核酸钳制PCR技术较传统的测序方法更为敏感,可以应用于有效模板浓度低的样品,为结肠癌个体化治疗前相关基因检测的有效方法.
目的 優化建立一種敏感、簡便、穩定地檢測結腸癌患者K-Ras基因突變的方法.方法 構建K-Ras基因第二外顯子12、13密碼子的野生型及突變型質粒,通過優化PCR及肽覈痠與特異性引物的濃度關繫,達到有效模闆濃度低的樣品K-Ras基因突變的檢測.結果 成功構建K-Ras基因第二外顯子12、13密碼子的野生型和突變型質粒.肽覈痠鉗製PCR條件優化包括:(1)最佳複性溫度為58℃和60℃；(2)有效模闆濃度為10-6pg/μl；(3)引物濃度與肽覈痠濃度的最佳比例為20∶1.在K-Ras突變型質粒與野生型質粒濃度比為1∶100時即可檢測到突變.結論 肽覈痠鉗製PCR技術較傳統的測序方法更為敏感,可以應用于有效模闆濃度低的樣品,為結腸癌箇體化治療前相關基因檢測的有效方法.
목적 우화건립일충민감、간편、은정지검측결장암환자K-Ras기인돌변적방법.방법 구건K-Ras기인제이외현자12、13밀마자적야생형급돌변형질립,통과우화PCR급태핵산여특이성인물적농도관계,체도유효모판농도저적양품K-Ras기인돌변적검측.결과 성공구건K-Ras기인제이외현자12、13밀마자적야생형화돌변형질립.태핵산겸제PCR조건우화포괄:(1)최가복성온도위58℃화60℃；(2)유효모판농도위10-6pg/μl；(3)인물농도여태핵산농도적최가비례위20∶1.재K-Ras돌변형질립여야생형질립농도비위1∶100시즉가검측도돌변.결론 태핵산겸제PCR기술교전통적측서방법경위민감,가이응용우유효모판농도저적양품,위결장암개체화치료전상관기인검측적유효방법.
