CAJ | 학술논문

目的制备抗人三碘甲腺原氨酸(T3)多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测总三碘甲腺原氨酸(TT3)的方法.方法以T3-牛血清清蛋白(BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化特异性的抗人T3多克隆抗体并连接辣根过氧化物酶(HRP).用FITC标记T3类似物,采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,固相抗原与T3校准品或样本中的T3非均衡竞争结合T3-HRP抗体,建立标准曲线,血清中TT3通过标准曲线计算浓度.由此建立TT3化学发光检测方法进行方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(BGG)包被(非FITC系统)的检测系统进行比较.将该方法应用于临床100份血清标本的检测,定量结果与德国Roche 2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elecsys 2010)结果进行比较.结果抗体对T3具有高度特异性,线性相关系数r>0.99,线性范围为0.1～8 ng/mL,分析灵敏度为0.1 ng/mL,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测.对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys 2010定量试剂盒的结果有很好的相关性,相关系数为0.961 9,临床符合率良好.结论该方法精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,适用于临床标本的检测.
목적 제비항인삼전갑선원안산(T3)다극륭항체,응용이류청산형광소(FITC)계통개발신형비균형경쟁기술,건립일충능엄범응용우림상검측총삼전갑선원안산(TT3)적방법.방법 이T3-우혈청청단백(BSA)위항원면역신서란대백토,제비항인T3다극륭항체,친화층석법순화특이성적항인T3다극륭항체병련접랄근과양화물매(HRP).용FITC표기T3유사물,채용항FITC항체포피발광판,FITC-T3유사물여항FITC항체결합형성고상항원,고상항원여T3교준품혹양본중적T3비균형경쟁결합T3-HRP항체,건립표준곡선,혈청중TT3통과표준곡선계산농도.유차건립TT3화학발광검측방법진행방법학평개병여직접용T3-우혈청γ구단백(BGG)포피(비FITC계통)적검측계통진행비교.장해방법응용우림상100빈혈청표본적검측,정량결과여덕국Roche 2010전화학발광전자동면역분석계통(Elecsys 2010)결과진행비교.결과 항체대T3구유고도특이성,선성상관계수r>0.99,선성범위위0.1～8 ng/mL,분석령민도위0.1 ng/mL,정밀도측시비내、비간변이계수CV<5%,검측결과우우비FITC계통적검측.대우림상혈청표본적검측,기정량결과여덕국Elecsys 2010정량시제합적결과유흔호적상관성,상관계수위0.961 9,림상부합솔량호.결론 해방법정밀성호、령민도고、은정성강,유량호적준학성,괄용우림상표본적검측.