中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2012年
14期
31-34
,共4页
鸡%WDR72%基因克隆%原核表达与纯化
鷄%WDR72%基因剋隆%原覈錶達與純化
계%WDR72%기인극륭%원핵표체여순화
WDR72是课题组前期初步鉴定的蛋壳强度相关基因,它是个新基因.本文首先参考GenBank中原鸡(G.gallus)的WDR72基因序列设计3对引物,从仙居鸡子宫组织的cDNA中克隆WDR72基因,并构建家鸡WDR72编码基因的pEGFP-N1真核表达重组质粒；其次,将所克隆的WDR72基因的3′端编码序列构建到原核表达质粒pET-28b,然后利用0.4mmol/L的IPTG于37℃诱导表达WDR72的C端肽链；最后利用500mmol/L的咪唑纯化该肽链,并免疫大白兔制备wdr72特异性多抗.上述工作将为深入研究WDR72基因的生物学特性及其生化功能提供基础.
WDR72是課題組前期初步鑒定的蛋殼彊度相關基因,它是箇新基因.本文首先參攷GenBank中原鷄(G.gallus)的WDR72基因序列設計3對引物,從仙居鷄子宮組織的cDNA中剋隆WDR72基因,併構建傢鷄WDR72編碼基因的pEGFP-N1真覈錶達重組質粒；其次,將所剋隆的WDR72基因的3′耑編碼序列構建到原覈錶達質粒pET-28b,然後利用0.4mmol/L的IPTG于37℃誘導錶達WDR72的C耑肽鏈；最後利用500mmol/L的咪唑純化該肽鏈,併免疫大白兔製備wdr72特異性多抗.上述工作將為深入研究WDR72基因的生物學特性及其生化功能提供基礎.
WDR72시과제조전기초보감정적단각강도상관기인,타시개신기인.본문수선삼고GenBank중원계(G.gallus)적WDR72기인서렬설계3대인물,종선거계자궁조직적cDNA중극륭WDR72기인,병구건가계WDR72편마기인적pEGFP-N1진핵표체중조질립；기차,장소극륭적WDR72기인적3′단편마서렬구건도원핵표체질립pET-28b,연후이용0.4mmol/L적IPTG우37℃유도표체WDR72적C단태련；최후이용500mmol/L적미서순화해태련,병면역대백토제비wdr72특이성다항.상술공작장위심입연구WDR72기인적생물학특성급기생화공능제공기출.
