中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
11期
1955-1960
,共6页
葛晶%成蓓%何平%戚本玲%柯丽
葛晶%成蓓%何平%慼本玲%柯麗
갈정%성배%하평%척본령%가려
胰岛素%酰基辅酶A%胆固醇酰基转移酶1%动脉粥样硬化%启动子%转录活性
胰島素%酰基輔酶A%膽固醇酰基轉移酶1%動脈粥樣硬化%啟動子%轉錄活性
이도소%선기보매A%담고순선기전이매1%동맥죽양경화%계동자%전록활성
目的:研究胰岛素对人单核/巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)基因P1和P7启动子的活性及其转录产物表达的影响,从而探讨它们在胰岛素调控ACAT1基因表达中的作用.方法:将人ACAT1基因P1和P7启动子调控的报告基因载体pGL3E-P1和pGL3E-P7 瞬时转染入体外培养人THP-1 单核细胞系,给予不同剂量的胰岛素处理,通过双萤光素酶报告系统检测P1和P7启动子的活性.体外培养THP-1细胞和由佛波脂诱导分化的巨噬细胞,同样用不同剂量的胰岛素干预24 h,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测THP-1细胞ACAT1 基因P1和P7启动子转录产物表达,用SYBR GreenⅠ实时定量RT-PCR方法检测THP-1细胞和诱导分化的巨噬细胞ACAT1 mRNA的表达.结果:不同剂量胰岛素处理的人THP-1细胞,与对照组相比,ACAT1基因 P1启动子的活性及其转录产物量均显著增强,并随胰岛素剂量的增加而升高.应用实时定量RT-PCR方法检测ACAT1 mRNA的表达与上述结果相一致.结论:胰岛素可通过激活人单核/巨噬细胞 ACAT1 基因 P1启动子上调ACAT1 mRNA的表达,其作用呈剂量依赖性.
目的:研究胰島素對人單覈/巨噬細胞酰基輔酶A:膽固醇酰基轉移酶1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)基因P1和P7啟動子的活性及其轉錄產物錶達的影響,從而探討它們在胰島素調控ACAT1基因錶達中的作用.方法:將人ACAT1基因P1和P7啟動子調控的報告基因載體pGL3E-P1和pGL3E-P7 瞬時轉染入體外培養人THP-1 單覈細胞繫,給予不同劑量的胰島素處理,通過雙螢光素酶報告繫統檢測P1和P7啟動子的活性.體外培養THP-1細胞和由彿波脂誘導分化的巨噬細胞,同樣用不同劑量的胰島素榦預24 h,應用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測THP-1細胞ACAT1 基因P1和P7啟動子轉錄產物錶達,用SYBR GreenⅠ實時定量RT-PCR方法檢測THP-1細胞和誘導分化的巨噬細胞ACAT1 mRNA的錶達.結果:不同劑量胰島素處理的人THP-1細胞,與對照組相比,ACAT1基因 P1啟動子的活性及其轉錄產物量均顯著增彊,併隨胰島素劑量的增加而升高.應用實時定量RT-PCR方法檢測ACAT1 mRNA的錶達與上述結果相一緻.結論:胰島素可通過激活人單覈/巨噬細胞 ACAT1 基因 P1啟動子上調ACAT1 mRNA的錶達,其作用呈劑量依賴性.
목적:연구이도소대인단핵/거서세포선기보매A:담고순선기전이매1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)기인P1화P7계동자적활성급기전록산물표체적영향,종이탐토타문재이도소조공ACAT1기인표체중적작용.방법:장인ACAT1기인P1화P7계동자조공적보고기인재체pGL3E-P1화pGL3E-P7 순시전염입체외배양인THP-1 단핵세포계,급여불동제량적이도소처리,통과쌍형광소매보고계통검측P1화P7계동자적활성.체외배양THP-1세포화유불파지유도분화적거서세포,동양용불동제량적이도소간예24 h,응용역전록취합매련반응(RT-PCR)검측THP-1세포ACAT1 기인P1화P7계동자전록산물표체,용SYBR GreenⅠ실시정량RT-PCR방법검측THP-1세포화유도분화적거서세포ACAT1 mRNA적표체.결과:불동제량이도소처리적인THP-1세포,여대조조상비,ACAT1기인 P1계동자적활성급기전록산물량균현저증강,병수이도소제량적증가이승고.응용실시정량RT-PCR방법검측ACAT1 mRNA적표체여상술결과상일치.결론:이도소가통과격활인단핵/거서세포 ACAT1 기인 P1계동자상조ACAT1 mRNA적표체,기작용정제량의뢰성.
