中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2005年
3期
218-221
,共4页
李娟%孟淑芳%张春涛%王佑春%尹红章%李德富
李娟%孟淑芳%張春濤%王祐春%尹紅章%李德富
리연%맹숙방%장춘도%왕우춘%윤홍장%리덕부
人乳头瘤病毒18型%宫颈癌%DNA疫苗
人乳頭瘤病毒18型%宮頸癌%DNA疫苗
인유두류병독18형%궁경암%DNA역묘
目的对HPV18型DNA疫苗的免疫原性和安全性进行初步评价.方法将HPV1gL1基因与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接,构建DNA疫苗质粒pcDNA-L1.使用脂质体将重组质粒转染COS-7细胞,用Western blot检测体外瞬时表达的抗原.将重组质粒pcDNA-L1肌肉注射BALB/c小鼠(100μg/只),加强免疫3次后分别采集血清,用ELISA法和Westernblot法检测抗体,实时荧光定量PCR法检测质粒的组织分布.采用ELISA法检测DNA疫苗免疫后抗核抗体和抗双链DNA抗体的效价.结果重组质粒可在真核细胞中有效地转录和表达HPV18 L1蛋白.小鼠免疫后可检出较高滴度的抗HPV18 L1抗体和特异条带.免疫后质粒主要分布在注射部位,且随着时间延长被清除;未检测到抗核抗体和抗双链DNA抗体.结论HPV18 L1重组质粒可诱导小鼠产生特异的体液免疫反应,且该DNA疫苗是安全的,为进一步研制开发HPV DNA疫苗打下了基础.
目的對HPV18型DNA疫苗的免疫原性和安全性進行初步評價.方法將HPV1gL1基因與真覈錶達載體pcDNA3.1(+)連接,構建DNA疫苗質粒pcDNA-L1.使用脂質體將重組質粒轉染COS-7細胞,用Western blot檢測體外瞬時錶達的抗原.將重組質粒pcDNA-L1肌肉註射BALB/c小鼠(100μg/隻),加彊免疫3次後分彆採集血清,用ELISA法和Westernblot法檢測抗體,實時熒光定量PCR法檢測質粒的組織分佈.採用ELISA法檢測DNA疫苗免疫後抗覈抗體和抗雙鏈DNA抗體的效價.結果重組質粒可在真覈細胞中有效地轉錄和錶達HPV18 L1蛋白.小鼠免疫後可檢齣較高滴度的抗HPV18 L1抗體和特異條帶.免疫後質粒主要分佈在註射部位,且隨著時間延長被清除;未檢測到抗覈抗體和抗雙鏈DNA抗體.結論HPV18 L1重組質粒可誘導小鼠產生特異的體液免疫反應,且該DNA疫苗是安全的,為進一步研製開髮HPV DNA疫苗打下瞭基礎.
목적대HPV18형DNA역묘적면역원성화안전성진행초보평개.방법장HPV1gL1기인여진핵표체재체pcDNA3.1(+)련접,구건DNA역묘질립pcDNA-L1.사용지질체장중조질립전염COS-7세포,용Western blot검측체외순시표체적항원.장중조질립pcDNA-L1기육주사BALB/c소서(100μg/지),가강면역3차후분별채집혈청,용ELISA법화Westernblot법검측항체,실시형광정량PCR법검측질립적조직분포.채용ELISA법검측DNA역묘면역후항핵항체화항쌍련DNA항체적효개.결과중조질립가재진핵세포중유효지전록화표체HPV18 L1단백.소서면역후가검출교고적도적항HPV18 L1항체화특이조대.면역후질립주요분포재주사부위,차수착시간연장피청제;미검측도항핵항체화항쌍련DNA항체.결론HPV18 L1중조질립가유도소서산생특이적체액면역반응,차해DNA역묘시안전적,위진일보연제개발HPV DNA역묘타하료기출.
