吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2007年
1期
98-101
,共4页
韩威%宫萍%常明%张瑜%张颖%王秋艳%胡轶虹%胡林森
韓威%宮萍%常明%張瑜%張穎%王鞦豔%鬍軼虹%鬍林森
한위%궁평%상명%장유%장영%왕추염%호질홍%호림삼
PC12细胞%鱼藤酮%蛋白质组学%细胞毒性作用
PC12細胞%魚籐酮%蛋白質組學%細胞毒性作用
PC12세포%어등동%단백질조학%세포독성작용
目的:探讨鱼藤酮诱导PC12细胞毒性作用的可能机制,为神经防护药物的研发提供理论基础.方法:将培养的PC12细胞分为正常对照组和0.5 μmol·L-1鱼藤酮实验组,持续作用72 h,MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342检测细胞凋亡;提取实验组和对照组细胞的总蛋白,应用荧光差异凝胶电泳系统(DIGE)获得差异蛋白点的表达信息;通过MALDI-TOF质谱鉴定差异蛋白点.结果:MTT法显示鱼藤酮实验组较正常对照组细胞存活率明显降低(P＜0.01);Hoechst 33342荧光染色显示鱼藤酮实验组可见较多凋亡细胞,表现为核边集、核固缩、核碎裂等特征性凋亡改变,其凋亡率明显高于对照组(P＜0.01).DIGE分析软件提示实验组点298的表达量高于对照组(P=0.004),点447的表达量低于对照组(P=0.009 5).通过质谱分析和数据库检索,鉴定为纽蛋白和线粒体顺乌头酸酶.结论:纽蛋白和线粒体顺乌头酸酶参与细胞损伤,可能成为神经防护药物作用的靶点.
目的:探討魚籐酮誘導PC12細胞毒性作用的可能機製,為神經防護藥物的研髮提供理論基礎.方法:將培養的PC12細胞分為正常對照組和0.5 μmol·L-1魚籐酮實驗組,持續作用72 h,MTT法檢測細胞存活率;Hoechst 33342檢測細胞凋亡;提取實驗組和對照組細胞的總蛋白,應用熒光差異凝膠電泳繫統(DIGE)穫得差異蛋白點的錶達信息;通過MALDI-TOF質譜鑒定差異蛋白點.結果:MTT法顯示魚籐酮實驗組較正常對照組細胞存活率明顯降低(P＜0.01);Hoechst 33342熒光染色顯示魚籐酮實驗組可見較多凋亡細胞,錶現為覈邊集、覈固縮、覈碎裂等特徵性凋亡改變,其凋亡率明顯高于對照組(P＜0.01).DIGE分析軟件提示實驗組點298的錶達量高于對照組(P=0.004),點447的錶達量低于對照組(P=0.009 5).通過質譜分析和數據庫檢索,鑒定為紐蛋白和線粒體順烏頭痠酶.結論:紐蛋白和線粒體順烏頭痠酶參與細胞損傷,可能成為神經防護藥物作用的靶點.
목적:탐토어등동유도PC12세포독성작용적가능궤제,위신경방호약물적연발제공이론기출.방법:장배양적PC12세포분위정상대조조화0.5 μmol·L-1어등동실험조,지속작용72 h,MTT법검측세포존활솔;Hoechst 33342검측세포조망;제취실험조화대조조세포적총단백,응용형광차이응효전영계통(DIGE)획득차이단백점적표체신식;통과MALDI-TOF질보감정차이단백점.결과:MTT법현시어등동실험조교정상대조조세포존활솔명현강저(P＜0.01);Hoechst 33342형광염색현시어등동실험조가견교다조망세포,표현위핵변집、핵고축、핵쇄렬등특정성조망개변,기조망솔명현고우대조조(P＜0.01).DIGE분석연건제시실험조점298적표체량고우대조조(P=0.004),점447적표체량저우대조조(P=0.009 5).통과질보분석화수거고검색,감정위뉴단백화선립체순오두산매.결론:뉴단백화선립체순오두산매삼여세포손상,가능성위신경방호약물작용적파점.
