生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
3期
500-503
,共4页
日本囊对虾%Kunitz型蛋白酶抑制剂%毕赤酵母%胰蛋白酶
日本囊對蝦%Kunitz型蛋白酶抑製劑%畢赤酵母%胰蛋白酶
일본낭대하%Kunitz형단백매억제제%필적효모%이단백매
SKPI(shrimp Kunitz-type protease inhibitor)是日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)体内的一个小分子多肽,含有一个Kunitz型结构域,属于丝氨酸蛋白酶抑制剂.目前已知丝氨酸蛋白酶抑制剂在节肢动物免疫系统中起着非常重要的作用,为了了解SKPI在对虾天然免疫系统中的作用,首先对其进行了重组表达.从日本囊对虾肝胰腺中扩增skpi的cDNA片段.插入改造后的pPIC9K酵母表达载体,获得的重组质粒转化至毕赤酵母GS115进行表达.由于改造的pPIC9K载体加入了6-His标签,因此利用Ni Sepharose High Performance对SKPI进行了高效纯化.初步的活性研究表明,重组表达的SKPI能特异性地抑制胰蛋白酶的水解活性.
SKPI(shrimp Kunitz-type protease inhibitor)是日本囊對蝦(Marsupenaeus japonicus)體內的一箇小分子多肽,含有一箇Kunitz型結構域,屬于絲氨痠蛋白酶抑製劑.目前已知絲氨痠蛋白酶抑製劑在節肢動物免疫繫統中起著非常重要的作用,為瞭瞭解SKPI在對蝦天然免疫繫統中的作用,首先對其進行瞭重組錶達.從日本囊對蝦肝胰腺中擴增skpi的cDNA片段.插入改造後的pPIC9K酵母錶達載體,穫得的重組質粒轉化至畢赤酵母GS115進行錶達.由于改造的pPIC9K載體加入瞭6-His標籤,因此利用Ni Sepharose High Performance對SKPI進行瞭高效純化.初步的活性研究錶明,重組錶達的SKPI能特異性地抑製胰蛋白酶的水解活性.
SKPI(shrimp Kunitz-type protease inhibitor)시일본낭대하(Marsupenaeus japonicus)체내적일개소분자다태,함유일개Kunitz형결구역,속우사안산단백매억제제.목전이지사안산단백매억제제재절지동물면역계통중기착비상중요적작용,위료료해SKPI재대하천연면역계통중적작용,수선대기진행료중조표체.종일본낭대하간이선중확증skpi적cDNA편단.삽입개조후적pPIC9K효모표체재체,획득적중조질립전화지필적효모GS115진행표체.유우개조적pPIC9K재체가입료6-His표첨,인차이용Ni Sepharose High Performance대SKPI진행료고효순화.초보적활성연구표명,중조표체적SKPI능특이성지억제이단백매적수해활성.
