中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
19期
3625-3628
,共4页
王金良%赵建宁%郭亭%岳鹏举%何劼%何志伟
王金良%趙建寧%郭亭%嶽鵬舉%何劼%何誌偉
왕금량%조건저%곽정%악붕거%하할%하지위
无支架%组织工程软骨%琼脂糖%免疫组织化学%组织构建
無支架%組織工程軟骨%瓊脂糖%免疫組織化學%組織構建
무지가%조직공정연골%경지당%면역조직화학%조직구건
背景:实验表明,软骨细胞在体外培养时,经常发生表型的丢失.但形成软骨细胞团块时可以维持软骨细胞表型,由此人们探讨无支架结构培养组织工程软骨的技术.目的:拟建立软骨细胞聚集培养体系,观察在琼脂糖表面培养软骨细胞,无支架条件下构建组织工程软骨的特点.设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-10/2007-04在解放军南京军区总医院骨科研究所完成.材料:SPF级新西兰白兔4只,2周龄,雌雄不限.方法:分离、提取兔关节软骨原代软骨细胞,将低熔点琼脂糖铺于24孔培养板表面,按每孔2.5×105接种提取的兔原代软骨细胞,在培养箱内培养,定期换液.主要观察指标:取10d标本行组织学、Ⅱ型胶原免疫组织化学检测.结果:10d时,软骨细胞自聚集形成有一定形状、大小的类软骨组织,苏木精-伊红染色可见软骨陷窝结构,甲苯胺蓝染色见紫红色异染,说明有蛋白聚糖的分泌.钙染色未见钙化, Ⅱ型胶原免疫组织化学染色有棕黄色颗粒,说明有Ⅱ型胶原分泌.结论:在琼脂糖表面构建组织工程软骨的培养体系,琼脂糖膜阻止软骨细胞的黏附和伸展,从而保持软骨细胞的圆形形态;软骨细胞在琼脂糖表面直接接触,加强了细胞之间的信息交流,有利于维持细胞的表型,维持软骨细胞分泌细胞外基质的特征.
揹景:實驗錶明,軟骨細胞在體外培養時,經常髮生錶型的丟失.但形成軟骨細胞糰塊時可以維持軟骨細胞錶型,由此人們探討無支架結構培養組織工程軟骨的技術.目的:擬建立軟骨細胞聚集培養體繫,觀察在瓊脂糖錶麵培養軟骨細胞,無支架條件下構建組織工程軟骨的特點.設計、時間及地點:單一樣本觀察,于2006-10/2007-04在解放軍南京軍區總醫院骨科研究所完成.材料:SPF級新西蘭白兔4隻,2週齡,雌雄不限.方法:分離、提取兔關節軟骨原代軟骨細胞,將低鎔點瓊脂糖鋪于24孔培養闆錶麵,按每孔2.5×105接種提取的兔原代軟骨細胞,在培養箱內培養,定期換液.主要觀察指標:取10d標本行組織學、Ⅱ型膠原免疫組織化學檢測.結果:10d時,軟骨細胞自聚集形成有一定形狀、大小的類軟骨組織,囌木精-伊紅染色可見軟骨陷窩結構,甲苯胺藍染色見紫紅色異染,說明有蛋白聚糖的分泌.鈣染色未見鈣化, Ⅱ型膠原免疫組織化學染色有棕黃色顆粒,說明有Ⅱ型膠原分泌.結論:在瓊脂糖錶麵構建組織工程軟骨的培養體繫,瓊脂糖膜阻止軟骨細胞的黏附和伸展,從而保持軟骨細胞的圓形形態;軟骨細胞在瓊脂糖錶麵直接接觸,加彊瞭細胞之間的信息交流,有利于維持細胞的錶型,維持軟骨細胞分泌細胞外基質的特徵.
배경:실험표명,연골세포재체외배양시,경상발생표형적주실.단형성연골세포단괴시가이유지연골세포표형,유차인문탐토무지가결구배양조직공정연골적기술.목적:의건립연골세포취집배양체계,관찰재경지당표면배양연골세포,무지가조건하구건조직공정연골적특점.설계、시간급지점:단일양본관찰,우2006-10/2007-04재해방군남경군구총의원골과연구소완성.재료:SPF급신서란백토4지,2주령,자웅불한.방법:분리、제취토관절연골원대연골세포,장저용점경지당포우24공배양판표면,안매공2.5×105접충제취적토원대연골세포,재배양상내배양,정기환액.주요관찰지표:취10d표본행조직학、Ⅱ형효원면역조직화학검측.결과:10d시,연골세포자취집형성유일정형상、대소적류연골조직,소목정-이홍염색가견연골함와결구,갑분알람염색견자홍색이염,설명유단백취당적분비.개염색미견개화, Ⅱ형효원면역조직화학염색유종황색과립,설명유Ⅱ형효원분비.결론:재경지당표면구건조직공정연골적배양체계,경지당막조지연골세포적점부화신전,종이보지연골세포적원형형태;연골세포재경지당표면직접접촉,가강료세포지간적신식교류,유리우유지세포적표형,유지연골세포분비세포외기질적특정.