解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2009年
1期
98-102
,共5页
李秋明%张喜梅%单智焱%张延清%雷蕾%金连弘
李鞦明%張喜梅%單智焱%張延清%雷蕾%金連弘
리추명%장희매%단지염%장연청%뢰뢰%금련홍
人骨髓间充质干细胞%神经前体细胞%5-氮杂胞苷%曲古菌素A%免疫荧光
人骨髓間充質榦細胞%神經前體細胞%5-氮雜胞苷%麯古菌素A%免疫熒光
인골수간충질간세포%신경전체세포%5-담잡포감%곡고균소A%면역형광
目的 观察体外培养的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的生物学特性,并探讨使其转分化为神经前体细胞(NPCs)的方法.方法以密度梯度离心和贴壁法相结合分离成人骨髓间充质干细胞,并观察细胞形态、生长、表面标记以及成骨和成软骨及成脂肪能力的情况.选用第3代细胞进行诱导,先经胚胎干细胞培养液扩增,再用加有5-氮胞苷和曲古菌素A的神经诱导液诱导,7d后,一部分样本进行Nestin、Sox2免疫荧光染色和RT-PCR检测;另一部分样本在含有B27的神经培养液中继续培养7d,然后进行NF-L的免疫荧光检测.结果分离培养的hMSCs纯度较高,CD29、CD44的阳性率均在90%以上;具有明显的成骨、成软骨和成脂肪能力;经5-氮杂胞苷和曲古菌素A作用后能向神经前体细胞分化,免疫荧光染色及RT-PCR结果显示,诱导后的细胞能特异性表达神经前体细胞标志物Nestin和Sox2;在神经培养液中继续培养后检测神经细胞标记物NF-L,可见较多阳性细胞.结论 hMSCs可在体外进行分离培养扩增,经药物修饰后具有向神经前体细胞分化的潜能.
目的 觀察體外培養的人骨髓間充質榦細胞(hMSCs)的生物學特性,併探討使其轉分化為神經前體細胞(NPCs)的方法.方法以密度梯度離心和貼壁法相結閤分離成人骨髓間充質榦細胞,併觀察細胞形態、生長、錶麵標記以及成骨和成軟骨及成脂肪能力的情況.選用第3代細胞進行誘導,先經胚胎榦細胞培養液擴增,再用加有5-氮胞苷和麯古菌素A的神經誘導液誘導,7d後,一部分樣本進行Nestin、Sox2免疫熒光染色和RT-PCR檢測;另一部分樣本在含有B27的神經培養液中繼續培養7d,然後進行NF-L的免疫熒光檢測.結果分離培養的hMSCs純度較高,CD29、CD44的暘性率均在90%以上;具有明顯的成骨、成軟骨和成脂肪能力;經5-氮雜胞苷和麯古菌素A作用後能嚮神經前體細胞分化,免疫熒光染色及RT-PCR結果顯示,誘導後的細胞能特異性錶達神經前體細胞標誌物Nestin和Sox2;在神經培養液中繼續培養後檢測神經細胞標記物NF-L,可見較多暘性細胞.結論 hMSCs可在體外進行分離培養擴增,經藥物脩飾後具有嚮神經前體細胞分化的潛能.
목적 관찰체외배양적인골수간충질간세포(hMSCs)적생물학특성,병탐토사기전분화위신경전체세포(NPCs)적방법.방법이밀도제도리심화첩벽법상결합분리성인골수간충질간세포,병관찰세포형태、생장、표면표기이급성골화성연골급성지방능력적정황.선용제3대세포진행유도,선경배태간세포배양액확증,재용가유5-담포감화곡고균소A적신경유도액유도,7d후,일부분양본진행Nestin、Sox2면역형광염색화RT-PCR검측;령일부분양본재함유B27적신경배양액중계속배양7d,연후진행NF-L적면역형광검측.결과분리배양적hMSCs순도교고,CD29、CD44적양성솔균재90%이상;구유명현적성골、성연골화성지방능력;경5-담잡포감화곡고균소A작용후능향신경전체세포분화,면역형광염색급RT-PCR결과현시,유도후적세포능특이성표체신경전체세포표지물Nestin화Sox2;재신경배양액중계속배양후검측신경세포표기물NF-L,가견교다양성세포.결론 hMSCs가재체외진행분리배양확증,경약물수식후구유향신경전체세포분화적잠능.
