基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2009年
3期
229-233
,共5页
刘为青%董坚%赵德萍%洪敏%杨军%邢海霞
劉為青%董堅%趙德萍%洪敏%楊軍%邢海霞
류위청%동견%조덕평%홍민%양군%형해하
乳腺癌%基因治疗%载体
乳腺癌%基因治療%載體
유선암%기인치료%재체
目的 探究乳腺癌特异性多肽携带外源生物分子进入特定肿瘤细胞的功能.方法 编码乳腺癌细胞特异性多肽(PⅠ)的序列插入质粒pGEX-2T,构建原核表达载体pGEX-2T-PⅠ,表达融合蛋白GST-PⅠ,亲和层析纯化,Western-blot鉴定.GST-PⅠ与人乳腺癌细胞MBA-MB-231体外共培养,免疫荧光检测PⅠ多肽携带GST蛋白的跨膜功能.结果 成功构建pGEX-2T-PⅠ原核表达载体,并在大肠杆菌中表达.融合蛋白占细菌总蛋白量的30%左右,纯化后蛋白纯度约为85%.免疫荧光检测显示,GST-PⅠ能特异性进入MDA-MB-231细胞.结论 乳腺癌特异性多肽PⅠ能够介导融合蛋白GST-PⅠ穿过细胞膜进入MDA-MB-231细胞内.
目的 探究乳腺癌特異性多肽攜帶外源生物分子進入特定腫瘤細胞的功能.方法 編碼乳腺癌細胞特異性多肽(PⅠ)的序列插入質粒pGEX-2T,構建原覈錶達載體pGEX-2T-PⅠ,錶達融閤蛋白GST-PⅠ,親和層析純化,Western-blot鑒定.GST-PⅠ與人乳腺癌細胞MBA-MB-231體外共培養,免疫熒光檢測PⅠ多肽攜帶GST蛋白的跨膜功能.結果 成功構建pGEX-2T-PⅠ原覈錶達載體,併在大腸桿菌中錶達.融閤蛋白佔細菌總蛋白量的30%左右,純化後蛋白純度約為85%.免疫熒光檢測顯示,GST-PⅠ能特異性進入MDA-MB-231細胞.結論 乳腺癌特異性多肽PⅠ能夠介導融閤蛋白GST-PⅠ穿過細胞膜進入MDA-MB-231細胞內.
목적 탐구유선암특이성다태휴대외원생물분자진입특정종류세포적공능.방법 편마유선암세포특이성다태(PⅠ)적서렬삽입질립pGEX-2T,구건원핵표체재체pGEX-2T-PⅠ,표체융합단백GST-PⅠ,친화층석순화,Western-blot감정.GST-PⅠ여인유선암세포MBA-MB-231체외공배양,면역형광검측PⅠ다태휴대GST단백적과막공능.결과 성공구건pGEX-2T-PⅠ원핵표체재체,병재대장간균중표체.융합단백점세균총단백량적30%좌우,순화후단백순도약위85%.면역형광검측현시,GST-PⅠ능특이성진입MDA-MB-231세포.결론 유선암특이성다태PⅠ능구개도융합단백GST-PⅠ천과세포막진입MDA-MB-231세포내.
