动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2010年
1期
24-27
,共4页
冉旭华%闻晓波%王密%李冬野%侯喜林
冉旭華%聞曉波%王密%李鼕野%侯喜林
염욱화%문효파%왕밀%리동야%후희림
猪戊型肝炎病毒%ORF2%主要抗原表位区%表达
豬戊型肝炎病毒%ORF2%主要抗原錶位區%錶達
저무형간염병독%ORF2%주요항원표위구%표체
利用分子生物学软件分析GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基酸序列,确定了其C端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了一对特异性引物,RT-PCR扩增该区域,并将此片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上,命名为pET30a-ORF2C,然后转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,1.0 mmol/L IPTG 37 ℃诱导表达.结果表明,RT-PCR扩增得到301 bp的片段,重组蛋白大小约为18 ku,与预期大小相符.Western blot分析表明,该蛋白与阳性血清发生特异性反应,为进一步利用其建立诊断方法奠定了基础.
利用分子生物學軟件分析GenBank公佈的豬戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基痠序列,確定瞭其C耑抗原性較高的區域,針對此區域設計併閤成瞭一對特異性引物,RT-PCR擴增該區域,併將此片段剋隆到原覈錶達載體pET30a(+)上,命名為pET30a-ORF2C,然後轉化大腸埃希菌BL21感受態細胞,1.0 mmol/L IPTG 37 ℃誘導錶達.結果錶明,RT-PCR擴增得到301 bp的片段,重組蛋白大小約為18 ku,與預期大小相符.Western blot分析錶明,該蛋白與暘性血清髮生特異性反應,為進一步利用其建立診斷方法奠定瞭基礎.
이용분자생물학연건분석GenBank공포적저무형간염병독DQ1주ORF2적안기산서렬,학정료기C단항원성교고적구역,침대차구역설계병합성료일대특이성인물,RT-PCR확증해구역,병장차편단극륭도원핵표체재체pET30a(+)상,명명위pET30a-ORF2C,연후전화대장애희균BL21감수태세포,1.0 mmol/L IPTG 37 ℃유도표체.결과표명,RT-PCR확증득도301 bp적편단,중조단백대소약위18 ku,여예기대소상부.Western blot분석표명,해단백여양성혈청발생특이성반응,위진일보이용기건립진단방법전정료기출.
