江西医药
江西醫藥
강서의약
JIANGXI MEDICAL JOURNAL
2010年
1期
9-11
,共3页
冯润%孙坚%王农荣%杨北%何士勤
馮潤%孫堅%王農榮%楊北%何士勤
풍윤%손견%왕농영%양북%하사근
甲型流感病毒%核蛋白%真核载体
甲型流感病毒%覈蛋白%真覈載體
갑형류감병독%핵단백%진핵재체
目的 构建甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)核蛋白(nucleoprotein.NP)基因的真核表达载体,转染Hela细胞,并用甲型流感病毒检测试剂盒(Flu A Rapid Test Kit)检测其表达情况.方法 用特异引物从甲型流感病毒cDNA中采用PCR技术克隆出NP基因,将其插入到真核表达质粒pcDNA3.1(+).酶切、PCR、测序鉴定后,构建好的peDNA3.1(+)/NP用脂质体转染法转染到Hela细胞,通过甲型流感病毒检测试剂盒检测其蛋白表达.结果 克隆出一个核苷酸长度为1432bp的基因,和A/PR/8/34(H1N1)(GenBank/NCB,GI:8486129)有98%的同源性,转染Hela细胞后用甲型流感病毒检测试剂盒检测到24h、48h、72h细胞内外的蛋白表达.结论 成功构建甲型流感病A/PR/8/34(H1N1)核蛋白基因的真核表达质粒,为进一步研究理化因素对该基因的影响、基因的结构和功能打下良好的基础.
目的 構建甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)覈蛋白(nucleoprotein.NP)基因的真覈錶達載體,轉染Hela細胞,併用甲型流感病毒檢測試劑盒(Flu A Rapid Test Kit)檢測其錶達情況.方法 用特異引物從甲型流感病毒cDNA中採用PCR技術剋隆齣NP基因,將其插入到真覈錶達質粒pcDNA3.1(+).酶切、PCR、測序鑒定後,構建好的peDNA3.1(+)/NP用脂質體轉染法轉染到Hela細胞,通過甲型流感病毒檢測試劑盒檢測其蛋白錶達.結果 剋隆齣一箇覈苷痠長度為1432bp的基因,和A/PR/8/34(H1N1)(GenBank/NCB,GI:8486129)有98%的同源性,轉染Hela細胞後用甲型流感病毒檢測試劑盒檢測到24h、48h、72h細胞內外的蛋白錶達.結論 成功構建甲型流感病A/PR/8/34(H1N1)覈蛋白基因的真覈錶達質粒,為進一步研究理化因素對該基因的影響、基因的結構和功能打下良好的基礎.
목적 구건갑형류감병독A/PR/8/34(H1N1)핵단백(nucleoprotein.NP)기인적진핵표체재체,전염Hela세포,병용갑형류감병독검측시제합(Flu A Rapid Test Kit)검측기표체정황.방법 용특이인물종갑형류감병독cDNA중채용PCR기술극륭출NP기인,장기삽입도진핵표체질립pcDNA3.1(+).매절、PCR、측서감정후,구건호적peDNA3.1(+)/NP용지질체전염법전염도Hela세포,통과갑형류감병독검측시제합검측기단백표체.결과 극륭출일개핵감산장도위1432bp적기인,화A/PR/8/34(H1N1)(GenBank/NCB,GI:8486129)유98%적동원성,전염Hela세포후용갑형류감병독검측시제합검측도24h、48h、72h세포내외적단백표체.결론 성공구건갑형류감병A/PR/8/34(H1N1)핵단백기인적진핵표체질립,위진일보연구이화인소대해기인적영향、기인적결구화공능타하량호적기출.
