解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2011年
5期
464-467
,共4页
张勇%张国宁%丛敬%倪月秋
張勇%張國寧%叢敬%倪月鞦
장용%장국저%총경%예월추
海马神经元%原代培养方法%转染%优化%大鼠
海馬神經元%原代培養方法%轉染%優化%大鼠
해마신경원%원대배양방법%전염%우화%대서
目的 建立一种稳定的大鼠胎鼠海马神经元培养方法并能够有效的鉴定其纯度,探讨用化学转染试剂体外转染大鼠胎鼠海马神经元的最佳转染条件.方法 分离Wista大鼠E18d胚胎并取海马组织,无血清培养基培养并做MAP2荧光染色鉴定其纯度.应用lipofectamine <'TM>2000转染试剂盒,大鼠神经元电转试剂盒,lipofectamine<'TM> LTX转染试剂盒,三种不同方法包被质粒转染体外培养海马神经元.转染后观察绿色荧光蛋白的表达情况,并用台盼兰检测细胞的存活率.结果 用无血清培养方法培养的海马神经元成活率好,MAP2荧光染色鉴定其纯度高于80%.三种转染方法的转染率lipofectamine<'TM> 2000转染试剂为(14.05±2.32)%,大鼠神经元电转试剂为(52.39±1.68)%,lipofectamine<'TM> LTX转染试剂为(22.87±5.32)%,其中电转试剂转染这种方法转染率最高.结论 电转试剂能有效地转染体外培养的大鼠胎鼠海马神经元,同时保持很好的神经元存活率,是一种比较合适的神经元转染方法.
目的 建立一種穩定的大鼠胎鼠海馬神經元培養方法併能夠有效的鑒定其純度,探討用化學轉染試劑體外轉染大鼠胎鼠海馬神經元的最佳轉染條件.方法 分離Wista大鼠E18d胚胎併取海馬組織,無血清培養基培養併做MAP2熒光染色鑒定其純度.應用lipofectamine <'TM>2000轉染試劑盒,大鼠神經元電轉試劑盒,lipofectamine<'TM> LTX轉染試劑盒,三種不同方法包被質粒轉染體外培養海馬神經元.轉染後觀察綠色熒光蛋白的錶達情況,併用檯盼蘭檢測細胞的存活率.結果 用無血清培養方法培養的海馬神經元成活率好,MAP2熒光染色鑒定其純度高于80%.三種轉染方法的轉染率lipofectamine<'TM> 2000轉染試劑為(14.05±2.32)%,大鼠神經元電轉試劑為(52.39±1.68)%,lipofectamine<'TM> LTX轉染試劑為(22.87±5.32)%,其中電轉試劑轉染這種方法轉染率最高.結論 電轉試劑能有效地轉染體外培養的大鼠胎鼠海馬神經元,同時保持很好的神經元存活率,是一種比較閤適的神經元轉染方法.
목적 건립일충은정적대서태서해마신경원배양방법병능구유효적감정기순도,탐토용화학전염시제체외전염대서태서해마신경원적최가전염조건.방법 분리Wista대서E18d배태병취해마조직,무혈청배양기배양병주MAP2형광염색감정기순도.응용lipofectamine <'TM>2000전염시제합,대서신경원전전시제합,lipofectamine<'TM> LTX전염시제합,삼충불동방법포피질립전염체외배양해마신경원.전염후관찰록색형광단백적표체정황,병용태반란검측세포적존활솔.결과 용무혈청배양방법배양적해마신경원성활솔호,MAP2형광염색감정기순도고우80%.삼충전염방법적전염솔lipofectamine<'TM> 2000전염시제위(14.05±2.32)%,대서신경원전전시제위(52.39±1.68)%,lipofectamine<'TM> LTX전염시제위(22.87±5.32)%,기중전전시제전염저충방법전염솔최고.결론 전전시제능유효지전염체외배양적대서태서해마신경원,동시보지흔호적신경원존활솔,시일충비교합괄적신경원전염방법.
