CAJ | 학술논문

[目的]建立一种稳定、高效的成人自体心肌干细胞体外培养扩增及特异性鉴定方法.[方法]手术中取下的心脏组织标本,通过胶原酶消化的方法获得细胞,使用自体血清进行贴壁培养和传代的方法纯化细胞,细胞增殖至3代后进行RT - PCR基因表达检测,流式细胞表面标记检测及染色体核型分析的鉴定.[结果]通过本实验的方法可以在成人心肌组织中分离和纯化心肌干细胞,并在体外可大量增殖,至3代细胞可增殖至5×10 7.RTPCR鉴定其具有全能干细胞因子Nanog、Oct -4、Sox -2、Rex -1的mRNA表达,及心肌转录因子Nkx2.5和GATA4的mRNA和蛋白表达;表达间质干细胞表面标记CD29、CD90、CD105;不表达造血干细胞表面标记CD45和人免疫抗原HLA - DR;且培养后46条染色体无移位和缺失等染色体突变.[结论]通过本研究确立了一种稳定、高效的成人自体心肌干细胞体外培养,扩增和特异性鉴定的方法,为自体心肌干细胞移植技术的临床应用奠定重要的基础.
[목적]건립일충은정、고효적성인자체심기간세포체외배양확증급특이성감정방법.[방법]수술중취하적심장조직표본,통과효원매소화적방법획득세포,사용자체혈청진행첩벽배양화전대적방법순화세포,세포증식지3대후진행RT - PCR기인표체검측,류식세포표면표기검측급염색체핵형분석적감정.[결과]통과본실험적방법가이재성인심기조직중분리화순화심기간세포,병재체외가대량증식,지3대세포가증식지5×10 7.RTPCR감정기구유전능간세포인자Nanog、Oct -4、Sox -2、Rex -1적mRNA표체,급심기전록인자Nkx2.5화GATA4적mRNA화단백표체;표체간질간세포표면표기CD29、CD90、CD105;불표체조혈간세포표면표기CD45화인면역항원HLA - DR;차배양후46조염색체무이위화결실등염색체돌변.[결론]통과본연구학립료일충은정、고효적성인자체심기간세포체외배양,확증화특이성감정적방법,위자체심기간세포이식기술적림상응용전정중요적기출.