中华检验医学杂志
中華檢驗醫學雜誌
중화검험의학잡지
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2007年
2期
196-198
,共3页
钱春艳%王升年%张玥%陈盈盈%施艳%何妍%陆皓%季育华
錢春豔%王升年%張玥%陳盈盈%施豔%何妍%陸皓%季育華
전춘염%왕승년%장모%진영영%시염%하연%륙호%계육화
巨细胞病毒%pp65蛋白%抗体,单克隆
巨細胞病毒%pp65蛋白%抗體,單剋隆
거세포병독%pp65단백%항체,단극륭
目的 制备抗HCMVpp65蛋白的单克隆抗体(简称单抗),并对其进行相关研究.方法 以重组表达的HCMVpp65蛋白为抗原,运用杂交瘤技术制备单抗,对获得的单抗进行Ig亚型、特异性、效价和亲和常数的鉴定与测定,并以免疫荧光检测法与进口同类产品进行比较.结果 获得3株针对HCMVpp65蛋白的单抗,即B6、G12、2B12;Ig亚型依次为IgG1κ型、IgG1κ型、IgMκ型;亲和常数依次为3.6×107 L/mol、3.8×107 L/mol、3.1×108 L/mol;免疫印迹试验结果表明,3株单抗都与HCMVpp65蛋白特异性的结合,除2B12外,B6、G12与EB病毒(EBV)、单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ、HSVⅡ均无交叉反应;与进口单抗平行检测140份临床标本,结果一致(r=1.00,P＞0.05).结论 成功获得3株稳定分泌抗HCMVpp65蛋白的杂交瘤细胞株,所产生的抗体特异性和亲和力较理想,为HCMVpp65蛋白抗原血症检测国产化试剂盒的研制奠定了基础.
目的 製備抗HCMVpp65蛋白的單剋隆抗體(簡稱單抗),併對其進行相關研究.方法 以重組錶達的HCMVpp65蛋白為抗原,運用雜交瘤技術製備單抗,對穫得的單抗進行Ig亞型、特異性、效價和親和常數的鑒定與測定,併以免疫熒光檢測法與進口同類產品進行比較.結果 穫得3株針對HCMVpp65蛋白的單抗,即B6、G12、2B12;Ig亞型依次為IgG1κ型、IgG1κ型、IgMκ型;親和常數依次為3.6×107 L/mol、3.8×107 L/mol、3.1×108 L/mol;免疫印跡試驗結果錶明,3株單抗都與HCMVpp65蛋白特異性的結閤,除2B12外,B6、G12與EB病毒(EBV)、單純皰疹病毒(HSV)Ⅰ、HSVⅡ均無交扠反應;與進口單抗平行檢測140份臨床標本,結果一緻(r=1.00,P＞0.05).結論 成功穫得3株穩定分泌抗HCMVpp65蛋白的雜交瘤細胞株,所產生的抗體特異性和親和力較理想,為HCMVpp65蛋白抗原血癥檢測國產化試劑盒的研製奠定瞭基礎.
목적 제비항HCMVpp65단백적단극륭항체(간칭단항),병대기진행상관연구.방법 이중조표체적HCMVpp65단백위항원,운용잡교류기술제비단항,대획득적단항진행Ig아형、특이성、효개화친화상수적감정여측정,병이면역형광검측법여진구동류산품진행비교.결과 획득3주침대HCMVpp65단백적단항,즉B6、G12、2B12;Ig아형의차위IgG1κ형、IgG1κ형、IgMκ형;친화상수의차위3.6×107 L/mol、3.8×107 L/mol、3.1×108 L/mol;면역인적시험결과표명,3주단항도여HCMVpp65단백특이성적결합,제2B12외,B6、G12여EB병독(EBV)、단순포진병독(HSV)Ⅰ、HSVⅡ균무교차반응;여진구단항평행검측140빈림상표본,결과일치(r=1.00,P＞0.05).결론 성공획득3주은정분비항HCMVpp65단백적잡교류세포주,소산생적항체특이성화친화력교이상,위HCMVpp65단백항원혈증검측국산화시제합적연제전정료기출.
