高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2008年
3期
299-305
,共7页
洪旭光%孙修勤%郑明刚%昝金东%曲凌云%张进兴
洪旭光%孫脩勤%鄭明剛%昝金東%麯凌雲%張進興
홍욱광%손수근%정명강%잠금동%곡릉운%장진흥
皱纹盘鲍%鲍防御素(hd-def)%cDNA%基因组%基因表达
皺紋盤鮑%鮑防禦素(hd-def)%cDNA%基因組%基因錶達
추문반포%포방어소(hd-def)%cDNA%기인조%기인표체
从构建的皱纹盘鲍肝肾cDNA文库中筛选到了鲍防御素基因EST.通过序列分析发现该基因的全长cDNA序列编码66个氨基酸残基,其前体由信号肽、前导肽和成熟肽组成.该前体的成熟肽含42个氨基酸(6个Cys),推测分子量为4323Da,等电点为8.02.氨基酸序列同源性分析表明,该多肽与昆虫防御素的相似性较高,最高可达70%.因成熟肽二级结构具有典型的昆虫防御素结构特征,该多肽应属于抗菌肽中的昆虫防御素亚家族,是一种新型抗菌肽,将其命名为鲍防御素hd-def.采用基因组步移法获得了全长4032bp的基因组序列.分析表明,该基因由3个内含子和4个外显子编码组成;3个内含子大小分别为497bp、2357bp和528bp,其中两个内含子存在于编码信号肽的序列中.用鳗弧菌和金黄色葡萄球菌刺激皱纹盘鲍,能诱导hd-def的表达.实验检测了5种组织,发现hd-def基因仅在肝胰腺中表达,具有明显的组织表达特异性;其表达属于诱导型表达,提示该基因可能参与皱纹盘鲍的抗细菌感染.
從構建的皺紋盤鮑肝腎cDNA文庫中篩選到瞭鮑防禦素基因EST.通過序列分析髮現該基因的全長cDNA序列編碼66箇氨基痠殘基,其前體由信號肽、前導肽和成熟肽組成.該前體的成熟肽含42箇氨基痠(6箇Cys),推測分子量為4323Da,等電點為8.02.氨基痠序列同源性分析錶明,該多肽與昆蟲防禦素的相似性較高,最高可達70%.因成熟肽二級結構具有典型的昆蟲防禦素結構特徵,該多肽應屬于抗菌肽中的昆蟲防禦素亞傢族,是一種新型抗菌肽,將其命名為鮑防禦素hd-def.採用基因組步移法穫得瞭全長4032bp的基因組序列.分析錶明,該基因由3箇內含子和4箇外顯子編碼組成;3箇內含子大小分彆為497bp、2357bp和528bp,其中兩箇內含子存在于編碼信號肽的序列中.用鰻弧菌和金黃色葡萄毬菌刺激皺紋盤鮑,能誘導hd-def的錶達.實驗檢測瞭5種組織,髮現hd-def基因僅在肝胰腺中錶達,具有明顯的組織錶達特異性;其錶達屬于誘導型錶達,提示該基因可能參與皺紋盤鮑的抗細菌感染.
종구건적추문반포간신cDNA문고중사선도료포방어소기인EST.통과서렬분석발현해기인적전장cDNA서렬편마66개안기산잔기,기전체유신호태、전도태화성숙태조성.해전체적성숙태함42개안기산(6개Cys),추측분자량위4323Da,등전점위8.02.안기산서렬동원성분석표명,해다태여곤충방어소적상사성교고,최고가체70%.인성숙태이급결구구유전형적곤충방어소결구특정,해다태응속우항균태중적곤충방어소아가족,시일충신형항균태,장기명명위포방어소hd-def.채용기인조보이법획득료전장4032bp적기인조서렬.분석표명,해기인유3개내함자화4개외현자편마조성;3개내함자대소분별위497bp、2357bp화528bp,기중량개내함자존재우편마신호태적서렬중.용만호균화금황색포도구균자격추문반포,능유도hd-def적표체.실험검측료5충조직,발현hd-def기인부재간이선중표체,구유명현적조직표체특이성;기표체속우유도형표체,제시해기인가능삼여추문반포적항세균감염.