CAJ | 학술논문

目的:构建含有人肾细胞癌特异性抗原G250主要T细胞表位区域、猴和鼠G250部分片段区域融合基因tG250的真核表达质粒,并在猴肾COS7细胞中表达.方法:通过基因合成和PCR技术构建人、猴和鼠G250区域融合基因tG250,将其插入含有人Igκ链前导信号肽(sig)、人IgG-Fc和糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定信号肽融合基因序列的细胞膜锚定修饰真核表达载体pCI-Fc-GPI中;将重组质粒pCI-Fc-tG250-GPI转染COS7细胞,流式细胞仪和免疫荧光检测其表达情况.结果: tG250融合基因经测序正确,PCR和酶切鉴定证明已成功连入真核表达载体pCI-Fc-tG250-GPI中;流式细胞仪和免疫荧光检测显示,重组质粒pCI-Fc-tG250-GPI在COS7细胞中得到很好的表达.结论:成功构建了重组质粒pCI-Fc-tG250-GPI,且在COS7细胞中可以有效表达,为以G250抗原为靶点基因疫苗的后续功能研究打下良好基础.
목적:구건함유인신세포암특이성항원G250주요T세포표위구역、후화서G250부분편단구역융합기인tG250적진핵표체질립,병재후신COS7세포중표체.방법:통과기인합성화PCR기술구건인、후화서G250구역융합기인tG250,장기삽입함유인Igκ련전도신호태(sig)、인IgG-Fc화당기린지선기순(GPI)묘정신호태융합기인서렬적세포막묘정수식진핵표체재체pCI-Fc-GPI중;장중조질립pCI-Fc-tG250-GPI전염COS7세포,류식세포의화면역형광검측기표체정황.결과: tG250융합기인경측서정학,PCR화매절감정증명이성공련입진핵표체재체pCI-Fc-tG250-GPI중;류식세포의화면역형광검측현시,중조질립pCI-Fc-tG250-GPI재COS7세포중득도흔호적표체.결론:성공구건료중조질립pCI-Fc-tG250-GPI,차재COS7세포중가이유효표체,위이G250항원위파점기인역묘적후속공능연구타하량호기출.