蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2009年
2期
282-286
,共5页
步翠玉%宗志鹏%李轶女%张志芳%张耀洲
步翠玉%宗誌鵬%李軼女%張誌芳%張耀洲
보취옥%종지붕%리질녀%장지방%장요주
家蚕%DnaJ基因%克隆%表达谱%实时荧光定量PCR
傢蠶%DnaJ基因%剋隆%錶達譜%實時熒光定量PCR
가잠%DnaJ기인%극륭%표체보%실시형광정량PCR
DnaJ蛋白是一种调节蛋白.从构建的家蚕蛹cDNA文库中检索到一条编码DnaJ蛋白的EST,并克隆获得家蚕DnaJ5基因(Bm-DnaJ5,GenBank登录号为FJ592078).该基因的开放阅读框长1056 bp,编码351个氨基酸,分子质量为38.93 kD,等电点为9.25.利用实时定量PCR技术对Bm-DnaJ5基因在家蚕不同组织和发育时期的时空表达谱进行定量分析,结果显示:该基因在5龄幼虫时期的各组织中都有表达,在睾丸中的表达量最高,拷贝数达到1.16×106个/μg,其次在头部、中肠、前部丝腺和翅原基中的表达量也较高,在气管丛中的表达量最低,拷贝数仅为1.84×104个/μg;在蛹中期的几个组织中均有表达,其中在眼和睾丸中的表达量较高,拷贝数分别为8.79×107个/μg和1.78×107个/μg,而在卵巢中的表达量最低,拷贝数仅为1.94×105个/μg.
DnaJ蛋白是一種調節蛋白.從構建的傢蠶蛹cDNA文庫中檢索到一條編碼DnaJ蛋白的EST,併剋隆穫得傢蠶DnaJ5基因(Bm-DnaJ5,GenBank登錄號為FJ592078).該基因的開放閱讀框長1056 bp,編碼351箇氨基痠,分子質量為38.93 kD,等電點為9.25.利用實時定量PCR技術對Bm-DnaJ5基因在傢蠶不同組織和髮育時期的時空錶達譜進行定量分析,結果顯示:該基因在5齡幼蟲時期的各組織中都有錶達,在睪汍中的錶達量最高,拷貝數達到1.16×106箇/μg,其次在頭部、中腸、前部絲腺和翅原基中的錶達量也較高,在氣管叢中的錶達量最低,拷貝數僅為1.84×104箇/μg;在蛹中期的幾箇組織中均有錶達,其中在眼和睪汍中的錶達量較高,拷貝數分彆為8.79×107箇/μg和1.78×107箇/μg,而在卵巢中的錶達量最低,拷貝數僅為1.94×105箇/μg.
DnaJ단백시일충조절단백.종구건적가잠용cDNA문고중검색도일조편마DnaJ단백적EST,병극륭획득가잠DnaJ5기인(Bm-DnaJ5,GenBank등록호위FJ592078).해기인적개방열독광장1056 bp,편마351개안기산,분자질량위38.93 kD,등전점위9.25.이용실시정량PCR기술대Bm-DnaJ5기인재가잠불동조직화발육시기적시공표체보진행정량분석,결과현시:해기인재5령유충시기적각조직중도유표체,재고환중적표체량최고,고패수체도1.16×106개/μg,기차재두부、중장、전부사선화시원기중적표체량야교고,재기관총중적표체량최저,고패수부위1.84×104개/μg;재용중기적궤개조직중균유표체,기중재안화고환중적표체량교고,고패수분별위8.79×107개/μg화1.78×107개/μg,이재란소중적표체량최저,고패수부위1.94×105개/μg.